Análise proteômica de plaquetas e plasma provenientes de pacientes com trombose venosa profunda

• Processo: 09/51047-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Joyce Maria Annichino-Bizzacchi
• Beneficiário: Mariane Cristina Flores Nascimento
• Instituição Sede: Centro de Hematologia e Hemoterapia (HEMOCENTRO). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Trombose venosa Plaquetas sanguíneas Proteoma Plasma (líquidos corporais)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Plaquetas | Plasma | Proteoma | Trombose Venosa Profunda

Resumo

A trombose venosa é uma doença multifatorial, resulta da ativação inapropriada da resposta hemostática e pode ocorrer em qualquer parte do sistema venoso. Possui uma elevada incidência e está associada à alta morbimortalidade por complicações, como a embolia pulmonar e a síndrome pós-flebítica. De 20 a 30% dos pacientes não apresentam fator desencadeante, sendo definida como trombose venosa espontânea. Além disso, a trombose venosa é considerada uma doença crônica, pois em 5 anos, aproximadamente 25% dos pacientes apresentarão recorrência. Assim, a identificação de novos fatores de risco que previnam a recorrência têm uma grande relevância na prática clínica. Nesse sentido, o mapeamento de proteínas provenientes de plaquetas e plasma de pacientes com trombose venosa profunda (TVP) são alvos interessantes de pesquisa e objetos deste estudo. Amostras sangue serão coletadas, de onde serão separadas as plaquetas e o plasma. As plaquetas serão lavadas e proteínas abundantes serão retiradas do plasma. As amostras serão congeladas em nitrogênio líquido e armazenadas. As concentrações proteicas serão verificadas, e em seguida serão realizadas eletroforeses 2-D, sendo que os spots de interesse serão extraídos dos géis e submetidos à espectrometria de massa MALDI-TOF e LC/MS/MS usando um nano-HPLC e um triplo-quádruplo associado a um espectrômetro de massa lineal-Trap (Q-TRAP). As proteínas serão identificadas com o auxílio dos programas ProFound e MASCOT contra as bases de dados NCBI e Swiss-Prot databases. As modificações pós-traducionais serão identificadas através do LC/MS/MS. Extratos de amostras serão analisados por Western Blot, ELISA e Análise Multiplex, onde proteínas selecionadas serão analisadas com anticorpos específicos monoclonais e policlonais. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

NASCIMENTO, Mariane Cristina Flores. Identificação de proteínas diferencialmente expressas em pacientes com trombose venosa profunda. 2012. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas Campinas, SP.