Caracterização molecular da via de síntese de selenocisteínas: estudos estruturais e funcionais da fosfoseril tRNA kinase (PSTK) humana

• Processo: 07/06590-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Otavio Henrique Thiemann
• Beneficiário: Daiana Evelin Martil
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Cristalografia de proteínas Biossíntese de proteínas Selenocisteína
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia | Fosfoseril tRNA sintetase | Pstk | Selenocisteina | Tradução | Cristgalografia de Proteínas

Resumo

O estudo de processos de tradução do código genético em proteínas desperta o interesse de diversos grupos pelo seu papel central no metabolismo celular. Em particular o estudo da via de síntese de novos aminoácidos, como a selenocisteína e a pirrolisina, que resultam na expansão do código genético dos 20 aminoácidos tradicionais para atualmente um total de 22 aminoácidos. O aminoácido selenocisteína representa a principal forma biológica de selênio. A síntese de selenocisteína e sua incorporação co-traducional em selenoproteínas como resposta a um códon UGA em fase requerem uma complexa maquinaria molecular. Essa via tem despertado interesse pela sua particular consequência evolutiva e potencial uso prático. O repertório completo de genes envolvidos na via de síntese do aminoácido selenocisteína (Sec) em eucariotos não é totalmente conhecido, apesar dos importantes avanços obtidos recentemente. Este projeto visa à clonagem e caracterização molecular da proteína fosfoseril tRNA kinase (PSTK) de humanos. Estudos de interação com o tRNA[ser]sec e seus mutantes por fluorescência e calorimetria de titulação isotérmica (ITC) serão realizados para determinar as constantes de ligação proteína-tRNA. Estudos estruturais da PSTK serão realizados por medidas de difração de raios-x a baixos ângulos (SAXS) e por ensaios de cristalização. Os estudos aqui propostos da PSTK irão auxiliar no entendimento do mecanismo de incorporação deste aminoácido e contribuir para entender o caminho evolutivo desta via por comparação com os resultados obtidos nos estudos em andamento da PSTK de kinetoplastida (Jaqueline P. Evangelista; mestrado). Estudos de validação da PSTK, assim como de outras proteínas da via de síntese de selenocisteínas, estão sendo realizados. Esses dados poderão ser de grande valia para eventuais iniciativas de desenho de inibidores contra este parasito e seus similares, tornando o estudo da PSTK humana de grande relevância. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MARTIL, Daiana Evelin. Estudos estruturais da Seril-tRNA Sintetase nativa e em interação com tRNAs cognatos de Trypanosoma brucei. 2014. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Física de São Carlos (IFSC/BT) São Carlos.