Efeito de inibidores de endonucleases na transferência gênica mediada por espermatozóides em camundongos

• Processo: 09/13523-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao
• Beneficiário: Fernanda Sevciuc Maria
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Camundongos Transgenia Endonucleases Citometria de fluxo Espermatozoides
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Camundongos | Citometria de fluxo | endonucleases | espermatozóides | Tgme | transgenia | Biotecnologias da reprodução

Resumo

O presente projeto propõe avaliar um aprimoramento da transferência gênica mediada por espermatozóides (TGME) para a produção de animais transgênicos na espécie murina. Apesar, da espécie murina, ser a de eleição para os estudos de TGME por apresentar os melhores resultados na produção de indivíduos positivos para o DNA de interesse, estes ainda não passam de 7%. Uma das explicações é a liberação das endonucleases (MAIONE et al.,1998 e 1997, respectivamente), quando da integração do DNA exógeno. Com base nesta colocação, o presente projeto visa aumentar a eficiência da TGME incorporando ao protocolo um inibidor de endonucleases, o ácido aurintricarboxílico (ATA) e com isso aumentar a integração do DNA exógeno ao embrião. Será realizado ensaio de digestão plasmidial para verificar o potencial do ATA na inibição das endonucleases espermáticas e a avaliação do DNA genômico pelos ensaios Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA) e Cometa Alcalino. Para avaliar a eficiência da integração do DNA exógeno ao espermatozóide, o mesmo será submetido à qPCR, sendo quantificado, a porcentagem de DNA integrado aos espermatozóides.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MARIA, Fernanda Sevciuc. Efeito de inibidores de endonucleases na transferência gênica mediada por espermatozoides em camundongos. 2012. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ/SBD) São Paulo.