A proteína FEZ1 e a formação do fenótipo de núcleos multilobulados ("flower-like"): mecanismos e consequências para o câncer.

• Processo: 10/02322-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Jörg Kobarg
• Beneficiário: Deivid Lucas dos Santos Migueleti
• Instituição Sede: Associação Brasileira de Tecnologia de Luz Síncrotron (ABTLuS). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Leucemia Expressão gênica Oncoproteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: expressão gênica | Fez1 | flower-like | Leucemia | núcleos multilobulados | resistência a quimioterápicos | Oncoproteínas

Resumo

A proteína UNC-76 foi identificada como necessária para a fasciculação e elongação de axônios do verme Caenorhabditis elegans. Os defeitos das larvas mutantes unc-76 sugerem uma função para UNC-76 durante o desenvolvimento do sistema nervoso tanto neste verme, quanto em Drosophila melanogaster. Da mesma forma, a proteína homóloga de mamíferos FEZ1 apresenta altos níveis de expressão de seu transcrito em tecidos neuronais e camundongos knockout para o gene FEZ1 apresentam desvios de comportamento que remetem a desordens neurológicas. O papel de FEZ1 para o correto desenvolvimento do sistema nervoso parece residir na sua associação com elementos do citoesqueleto e vias de sinalização (e.g., PKCz), contribuindo assim para o crescimento axonal e a polarização celular. Trabalhos do grupo mostraram que FEZ1 é uma proteína multifuncional (hub), capaz de interagir com inúmeras proteínas, através de domínios coiled-coil C-terminais. Além disso, estudos estruturais mostraram que FEZ1 é uma proteína naturalmente desenovelada e se apresenta como um dímero em solução. Isso suporta a hipótese de que FEZ1 atua junto ao citoesqueleto como uma proteína adaptadora dimérica e bivalente. Hipótese reforçada pelas observações de que FEZ1 interage e colocaliza com elementos do citoesqueleto (e.g., Nek1 e CLASP2). Ademais, a superexpressão de FEZ1, em células HEK293, provoca o aparecimento de núcleos multilobulados ("flower-like") em mais de 40% das células transfectadas, 64 horas após a transfecção, e tal fenótipo é revertido sob tratamento com nocodazol, uma droga que despolimeriza microtúbulos. Interessantemente, tal fenótipo é comum em alguns tipos de leucemia e já foi associado à resistência a drogas. Tendo isso em vista, esse projeto visa estudar o papel funcional da proteína FEZ1 na progressão de subtipos de leucemia mielóide aguda, bem como a mecanística por trás da formação do fenótipo de núcleos multilobulados. Para tal, blastos leucêmicos de pacientes com os subtipos M4 e M5 da LMA serão avaliados, por Real Time PCR e imunofluorescência, quanto à superexpressão de FEZ1. Através da construção de mutantes de FEZ1 e posterior transfecção de células em cultura, será investigado como a dimerização de FEZ1 contribui para a formação do fenótipo "flower-like". Finalmente, será investigado, por ensaio colorimétrico de viabilidade celular (MTT), se a aquisição de tal fenótipo mediante a superexpressão de FEZ1 promove aumento ou diminuição da viabilidade celular, bem como confere resistência a quimioterápicos.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MIGUELETI, Deivid Lucas dos Santos. A proteína FEZ1 e a formação dos núcleos multilobulados. 2012. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.