Avaliação da capacidade de diferenciação das células estromais mesenquimais multipotentes do líquido amniótico em células de linhagem pulmonar

• Processo: 10/02531-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Geraldo Duarte
• Beneficiário: Willys Tristão
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Células-tronco Pulmão Genética médica Líquido amniótico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células Estromais Mesenquimais | Células tronco | Líquido amniótico | Pneumócito Tipo-II | pulmão | Genética Humana

Resumo

Células tronco são células indiferenciadas que tem como principal característica a sua capacidade de autorrenovação mantendo esse estado indiferenciado e também sua capacidade de diferenciação em diversos tipos de tecidos. O líquido amniótico do terceiro trimestre gestacional, possui células estromais mesenquimais multipotentes (CEMM), as quais apresentam a capacidade de autorrenovação e marcadores de linhagem embrionária. As CEMM apresentam vantagem sobre as células-tronco embrionárias pela facilidade com que podem ser obtidas, pela incapacidade de produzir tumores quando implantadas em camundongos e por apresentarem baixa antigenicidade.A estrutura pulmonar possui complexa estrutura epitelial e incompleto entendimento do desenvolvimento potencial de anormalidades e doenças. Dessa forma, torna-se uma área de especial interesse à biologia de células tronco, para a medicina regenerativa e para a farmacologia. A prematuridade, os eventos que a provocam e as intervenções que dela decorrem, alteram de maneira permanente em maior ou menor grau, o desenvolvimento do sistema respiratório. Doenças pulmonares ligadas à prematuridade podem ser citadas, entre elas a síndrome da angústia respiratória, hemorragia pulmonar, pneumonias, hérnia diafragmática congênita e displasia bronco-pulmonar.A terapia com células pluripotentes apresenta-se como um grande potencial no avanço para tratamento de diversas doenças, entre elas as doenças pulmonares, que atingem todas as idades. Por apresentarem características bastante primitivas, as CEMM do líquido amniótico tornam-se um bom atrativo para novas terapias em recém-nascidos pré-termo que são acometidos por algum tipo de doença pulmonar, propiciando maior eficácia no tratamento e evitando efeitos colaterais. Nossos objetivos são isolar e caracterizar in vitro as CEMM do líquido amniótico em gestações a termo, avaliando a capacidade de autorrenovação e diferenciação dessas células em células da linhagem pulmonar. Vamos também analisar o perfil da expressão gênica global em CEMM antes e após a diferenciação. Para a caracterização das CEMM os procedimentos utilizados serão: a) Citometria de Fluxo; e, b) diferenciação em osteoblastos e adipócitos. A capacidade de autorrenovação será testada por: a) Citometria de Fluxo; e, b) Real Time PCR. Para a diferenciação in vitro as CEMM serão cultivadas em meio SAGM e testadas por: a) Imunofluorescência; e, b) Real Time PCR. Por fim, para avaliação de expressão gênica, o método de microarray será utilizado.