Inversão sexual e conservação de Serranídeos: viabilidade na utilização de inibidores de aromatase e monitoramento histofisiológico durante a inversão do sexo da garoupa (Epinephelus marginatus), hermafrodita protogínico

• Processo: 08/04775-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Comparada
• Pesquisador responsável: Renata Guimarães Moreira Whitton
• Beneficiário: Bruno Cavalheiro Araújo
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/59122-7 - Inversão sexual e conservação de serranideos: viabilidade na utilização de inibidores de aromatase e monitoramento histofisiologico durante a inversão do sexo da garoupa (Epinephelus marginatus), hermafrodita protogínica, AP.R
• Assunto(s): Fisiologia da conservação Peixes Serranidae Reprodução animal Transtornos do desenvolvimento sexual Endocrinologia veterinária Hormônios esteroides gonadais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Endocrinologia | Fisiologia da Conservação | hermafroditismo | Peixes | Reprodução | Serranidae | endocrinologia

Resumo

Como pode ser observado no projeto de pesquisa em anexo, o presente trabalho envolve diversas etapas de análise de amostras em laboratório, destacando aqui análises como histologia e imunohistoquímica das gônadas e hipófise, detecção de células apoptóticas, determinação de viabilidade do sêmen e ainda determinação de esteróides gonadais. Além disso, o envolvimento com as atividades de campo é intenso, haja vista que os animais jovens permanecerão 60 dias em condições experimentais na Base do Instituto de Pesca em Ubatuba, por dois períodos experimentais. E ainda, temos a manutenção dos animais adultos, por um período de tempo que será determinado pelo monitoramento do perfil dos esteróides gonadais. O desenvolvimento do trabalho em 2 locais distintos, exige um apoio técnico, que será imprescindível para a condução do trabalho dentro do cronograma proposto e disponibilizar os resultados dentro de um prazo adequado para que se possa iniciar a aplicação em grande escala da inversão sexual, que contribuirá, como citado no projeto para o repovoamento da espécie em estudo. Desta forma, as atividades propostas para o técnico envolvido no presente trabalho serão:1. Manutenção da rotina básica do laboratório, como limpeza de vidraria e controle do estoque de insumos necessários à condução do projeto;2. Levantamento de custos e aquisição de insumos e equipamentos;3. Auxílio ao pesquisador no controle financeiro do projeto4. Apoio na determinação dos esteróides gonadais - utilização de kits de Elisaimunoensaio para a quantificação de estradiol, testosterona, 11 ceto-testosterona (11-kt) e 17a-hidroxiprogesterona;5. Apoio nas análises histológicas e imunohistoquímicas das gônadas e hipófise - A técnica de histologia demanda de muito tempo, pois envolve o preparo das amostras (desidratação e diafanização) para a inclusão em parafina ou paraplast. Esta fase demanda de cerca de 8-10 horas seguidas, devido ao grande número de banhos envolvidos. Na sequência estes blocos de parafina contendo as amostras serão cortados em micrótomo e, no caso das hipófises, a correta interpretação das células secretoras, muitas vezes envolve a necessidade de se realizar cortes seriados, o que demanda bastante tempo também. Etapas como coloração são mais rápidas. As técnicas a serem utilizadas nestas análises estão detalhadamente descritas no projeto em anexo.6. Apoio na detecção de células apoptóticas (método de TUNEL) - Esta técnica certamente será importante para responder a uma questão crucial deste projeto, que é a ocorrência do processo de apoptose do tecido germinativo masculino. É a primeira vez que esta técnica será empregada em nosso laboratório, portanto requeremos um envolvimento grande de tempo para definição dos protocolos. Vale ainda destacar aqui que, no caso da concessão da bolsa, será escolhido um técnico que tenha disponibilidade para, sem custo adicional, participar das coletas de campo. Este pedido está sendo solicitado, pois, o Departamento de Fisiologia do IBUSP não dispõe de recursos humanos de apoio técnico suficiente para disponibilizar a todos os docentes. (AU)