Análise da expressão de fimbria e cápsula em amostras de Porphyromonas gingivalis.

• Processo: 10/07542-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2010
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
• Pesquisador responsável: Marcia Pinto Alves Mayer
• Beneficiário: Maike Paulino da Silva
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 09/53958-1 - Analise da expressao de fimbria e capsula em amostras de porphyromonas gingivalis, AP.R
• Assunto(s): Porphyromonas gingivalis Microbiologia oral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Microbiologia Oral | periodontia | Porphyromonas gingivalis | Microbiologia oral

Resumo

Introdução: Porphyromonas gingivalis, associado à periodontite crônica, apresenta diversidade que poderia refletir sua virulência. Embora as fímbrias sejam envolvidas na interação da bactéria com células epiteliais e outros substratos, algumas amostras capsuladas consideradas virulentas em modelos animais, não expressam a fímbria, sendo sua expressão regulada por um Complexo sistema de dois componentes FimSR. Objetivo: testar a hipótese de que variações na região promotora e na expressão de fimS entre diferentes amostras de P. gingivalis influenciariam a expressão de fímbrias. Será determinada a seqüência da região promotora de fimS de linhagens de P. gingivalis caracterizadas por PFGE e avaliada a expressão das fímbrias. Estes dados serão relacionados à expressão dos genes fimS, pg2130 e fimA e às seqüências da região promotora de fimS e sua expressão. Também será avaliada a presença de cápsula e determinada a relação entre fenótipo K+ e a estrutura populacional de P. gingivalis. Métodos: serão analisadas 25 cepas de P. gingivalis previamente genotipadas com base em fimA. Como controle, serão analisadas as cepas ATCC33277 (fimbriada, genótipo fimA I, K-) e W83 (afimbriada, genótipo fimA IV, K1). A região promotora de fimS será seqüenciada e a transcrição de fimS, pg2130 e fimA será determinada in vitro e após contato com célula epitelial . A expressão de FimA será monitorada por Western blot e a presença de fímbria determinada por microscopia eletrônica. Além disso será analisada a capacidade de auto agregação através do ensaio de hidrofobicidade; presença da cápsula por microscopia óptica; detecção do lócus de biossíntese do polissacarídeo capsular (BPC) e genótipo associado ao sorotipo K1, que é o mais virulento. Estes dados serão comparados com a estrutura filogenética da população estudada, através de MLST e PFGE.