Características de virulência de genótipos de Streptococcus mutans isolados de biofilme cariogênico formado in vivo e in situ

• Processo: 08/11371-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Cinthia Pereira Machado Tabchoury
• Beneficiário: Patricia Ribeiro Batista
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/08000-9 - Características de virulência de genótipos de Streptococcus mutans isolados de biofilme cariogênico formado in vivo e in situ, AP.R
• Assunto(s): Virulência Placa bacteriana Mutans Cariologia Micro-organismos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biofilme dental | microrganismos | mutans | S | Virulência | Cariologia

Resumo

É bem conhecido que a cavidade bucal apresenta diversidade genotípica de Streptococcus mutans e que esses diferentes genótipos podem apresentar diferentes capacidades de virulência. Dessa forma, o presente projeto tem por objetivo avaliar a acidogenicidade, aciduricidade e atividade de F-ATPase de genótipos de S. mutans previamente isolados do biofilme dental de 5 voluntários formado in vivo e in situ na presença ou ausência de sacarose. Para análise da acidogenicidade, os genótipos serão incubados em meio BHI caldo por 18 horas. A cultura será centrifugada e o pellet será ressuspendido em solução de KCl + MgCl2. Glicose será adicionada à suspensão e o pH será monitorado por 180 minutos. Para análise da aciduricidade, os genótipos serão reativados em meio BHI ágar, e suas unidades formadoras de colônia serão coletadas e inoculadas em caldo BHI por 18 horas. Essa cultura será diluída para avaliação do crescimento bacteriano até o correspondente à metade da fase de crescimento exponencial. Alíquotas dessa suspensão serão centrifugadas e o pellet de bactérias será ressupendido em tampão glicina com diferentes pHs (pH 7,0, pH 5,0 ou pH 2,8). Imediatamente após a ressuspensão e após 30 e 60 minutos, alíquotas serão coletadas e semeadas em meio BHI ágar para a quantificação da viabilidade celular, por meio de contagem de unidades formadoras de colônias. Da cultura de 18 horas, alíquotas serão coletadas, centrifugadas e o pellet será permeabilizado com tolueno. Será adicionado ATP à suspensão e o fosfato inorgânico liberado será dosado, calculando-se a atividade de ATPase de cada genótipo.