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Determinação da composição da película adquirida formada sobre esmalte e dentina e da sua modificação após exposição ácida: estudo proteômico

Processo: 11/03155-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Data de Início da vigência: 01 de abril de 2011
Data de Término da vigência: 31 de julho de 2011
Área de conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
Pesquisador responsável:Marília Afonso Rabelo Buzalaf
Beneficiário:Taísa Ribas Delecrode
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:10/15216-0 - Determinação da composição da película adquirida formada sobre esmalte e dentina e da sua modificação após exposição ácida: estudo proteômico, AP.R
Assunto(s):Bioquímica   Erosão dentária   Esmalte dentário   Cárie dentária   Dentina   Proteoma
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Cárie Dentária | dentina | erosão dentária | esmalte | película adquirida | Proteoma | Bioquímica

Resumo

O objetivo deste trabalho será comparar o perfil protéico em películas adquiridas a exposição a dois tipos de ácido: lático e cítrico. Para o projeto, serão utilizados 54 blocos de esmalte e 54 blocos de dentina humana (3X3 mm). Os experimentos serão realizados em quatro dias consecutivos. Em cada dia, os voluntários (n=9) utilizarão um dispositivo mandibular contendo 6 blocos de esmalte e 6 de dentina. Para o projeto, após permanecer com o dispositivo na cavidade bucal por 10 ou 120 minutos para formação de película adquirida, os blocos serão imersos em ácido cítrico (1%, pH 2,5) por 1 minuto ou ácido lático (0,1 M pH 4,8) ou água deionizada por 30 minuto sob agitação a 37ºC. Na sequência, a película será removida com um papel de filtro umedecido em ácido cítrico a 3%. Este procedimento será repetido por mais dois dias adicionais. Será feito um "pool' com os papeis de filtro obtidos dos 9 voluntários, para cada tipo de substrato, tempo de coleta e tipo de ácido. Este "pool" compreenderá também as amostras coletadas no segundo e terceiro dias. No quarto dia, os procedimentos serão repetidos, mas não será feito o "pool' das amostras dos diferentes voluntários, para que seja possível avaliar a variabilidade individual. Após extração das proteínas, as mesmas serão submetidas a fracionamento por cromatografia de troca iônica. As frações coletadas serão concentradas e submetidas à cromatografia liquida de fase reversa interligada a um espectrômetro de massas (LC-ESI-MS/MS). Os dados obtidos de MS/MS serão processados e submetidos conjuntamente ao programa SQUEST (Bioworks Browser 3.2, Thermo-Finnigan, São Jose, CA, USA). As buscas serão feitas utilizando-se os bancos de dados SWISS-PROT e TrEMBL .

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