Resumo
Os estudos em citogenética de peixes Neotropicais tem se expandido consideravelmente nos últimos anos, principalmente devido à incorporação de novas técnicas de obtenção e interpretação de dados cariotípicos. O aperfeiçoamento de técnicas de bandamento cromossômico, o emprego de fluorocromos base específicos, o uso da metodologia de análise filogenética e a hibridação in situ com sondas fluorescentes têm sido responsáveis em grande parte pela expansão do conhecimento e compreensão dos processos evolutivos que ocorrem em peixes Neotropicais. Nesse sentido, o desenvolvimento de sondas específicas como as de genes ribossômicos e de histonas, constituídas por DNA de moderada repetitividade, as de DNA altamente repetitivo (DNA satélite) e o advento da microdissecção cromossômica, método que possibilita o isolamento direto do DNA de qualquer região citogeneticamente reconhecida, tem possibilitado a identificação e localização de segmentos específicos em cromossomos metafásicos, com o uso da técnica denominada FISH, ampliando ainda mais as perspectivas de análise e estudo nesse grupo de vertebrados. No entanto, o relacionamento entre muitos grupos necessita ainda de um melhor esclarecimento. O presente estudo se insere no programa geral de estudos de Citogenética e Genética Molecular de Peixes Neotropicais em desenvolvimento no Laboratório de Biologia e Genética de Peixes (IBB/UNESP/BOTUCATU), que tem como objetivo principal a análise citogenética convencional e em nível molecular de espécies e populações de peixes do gênero Characidium das principais bacias hidrográficas brasileiras. O trabalho terá por base a análise citogenética convencional, com a aplicação das técnicas de coloração por Giemsa, RONs e bandamento C para caracterização do número diplóide, fórmula cariotípica, identificação de cromossomos sexuais e cromossomos B; e também de técnicas moleculares, com a aplicação dos fluorocromos bases específicos CMA3 e DAPI, localização dos genes de DNAr 18S e 5S, distribuição cromossômica das sequências teloméricas (TTAGGG)n, localização de clusters para as proteínas histônicas H1, H3 e H4, identificação cromossômica de elementos retrotransponíveis Rex1 e Rex3 e também a microdissecção dos cromossomos sexuais e supranumerários ou B, para produção de sondas e sua hibridização in situ em cromossomos mitóticos. Espera-se, com isso, caracterizar espécies de Characidium ainda desconhecidas citogeneticamente, mapear fisicamente as sequências gênicas referidas em seu genoma e ainda caracterizar a abrangência territorial de ocorrência do sistema sexual ZZ-ZW existente em algumas espécies. Tais informações poderão auxiliar na compreensão do processo de diversificação cariotípica neste grupo de peixes e, por conseguinte, dos mecanismos envolvidos na sua especiação.
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