Investigação sobre a conexão entre regulação do metabolismo de carboidratos e de nitrogênio em Neurospora crassa. Papel do fator de transcrição NIT2 na regulação do metabolismo de glicogênio.

• Processo: 11/21527-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Celia Bertolini
• Beneficiário: Fernanda Barbosa Cupertino
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica Fatores de transcrição
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ChIP | Cre-1 | Fator de transcrição | Nit2 | Regulação gênica | Biologia Molecular de Microorganismos

Resumo

O principal objetivo do presente projeto é a caracterização funcional do fator de transcrição NIT2 (descrito como regulador do metabolismo de nitrogênio em Neurospora crassa) como um possível regulador do metabolismo do glicogênio no fungo. Resultados prévios de nosso laboratório mostraram que em condições normais de crescimento, este fungo (linhagem selvagem) acumula glicogênio no final da fase exponencial e degrada-o no início da fase estacionária. Em uma situação de estresse, tal como choque térmico (30ºC para 45ºC), é bem conhecido que o fungo degrada glicogênio. Além disso, na mesma condição ambiental a transcrição do gene gsn que codifica a enzima glicogênio sintase (enzima regulatória da via de síntese) é severamente reduzida e recuperada quando o fungo (linhagem selvagem) retorna à temperatura normal de crescimento (30ºC). Recentemente, foi mostrado que a linhagem nit2KO apresenta um comportamento diferente ao que é descrito para a linhagem selvagem: ocorre um hiper-acúmulo de glicogênio tanto antes como depois do estresse térmico. Na tentativa de compreender os mecanismos moleculares envolvidos nesta regulação, as regiões 5'-flanqueadoras dos genes gsn e gpn (codificador da glicogênio fosforilase) foram analisadas em relação à presença de elementos de DNA cis para o fator de transcrição NIT2. Um motif foi identificado na 5'-gsn e cinco motifs foram identificados na 5'-gpn. Em uma análise preliminar, foi observado que proteínas do extrato bruto de micélio crescido em condições fisiológicas foram capazes de se ligar a um fragmento do promotor gsn contendo o motif NIT2. Este projeto tem como objetivo principal caracterizar de maneira mais detalhada o papel deste fator de transcrição na regulação do metabolismo de glicogênio.