Treinamento técnico em superexpressão e imunoprecipitação de proteínas de ligação a RNA em cultura de células HEK293

• Processo: 13/00655-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Katlin Brauer Massirer
• Beneficiário: Fulvia Di Pillo
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/00195-3 - Redes de regulação pós-transcricional por proteínas de ligação a RNA em células tronco embrionárias humanas, AP.JP
• Assunto(s): Células-tronco Biologia computacional Análise de sequência de RNA RNA Proteínas de ligação a RNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bioinformática | Células tronco | Proteínas de ligação a RNA | RNA-seq | Rna

Resumo

Proteínas de ligação a RNAs (ou RNA binding proteins- RBPs) exercem regulação celular em várias etapas após a transcrição gênica. A fim de exercerem as funções específicas comoregulação de splicing, transporte de RNAs mensageiros e iniciação de tradução protéica as RBPs fazem parte de diferentes complexos proteicos. As proteínas que interagem com as RBPsem cada uma de suas funções, no entanto, são ainda pouco conhecidas. Neste cenário, a elucidação de complexos protéicos formados pelas RPBs irá auxiliar no entendimento domecanismo básico de regulação da expressão gênica e no entendimento da função das RPBs em processos patológicos.No presente projeto propomos que um técnico TT-3 auxilie em etapas do Projeto Jovem Pesquisador que necessitem de otimização de alguns reagentes. Este técnico irá trabalhar naotimização da superexpressão de RPBs em sistema estabelecido de cultura de células tumoraisHEK293T (human embryonic kidney cells) e nas etapas de teste de anticorpos para western blot e imunoprecipitação das proteínas expressas. Resultados obtidos pelo técnico irão refletirsua capacidade de aprendizado e especialização nos experimentos. Estes resultados irão colaborar também para o sucesso e maior rapidez nos projetos dos demais membros dolaboratório e poderão ser apresentados como parte de pôster em congresso.Neste contexto, o programa de Treinamento Técnico aqui proposto adéqua-se a um profissional recém-graduado em nível superior que tenha conhecimentos básicos de biologia edas técnicas de laboratório.