Validação de Métodos Analíticos de Absorção, Distribuição, Metabolismo e Eliminação (ADME in vitro) utilizando a técnica de LC-MS/MS para Aplicação no Processo de Desenvolvimento de Novos Fármacos

• Processo: 13/02721-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
• Pesquisador responsável: Daniel Temponi Lebre
• Beneficiário: Telma Carolina Clirisostomo Francisco
• Vinculado ao auxílio: 11/51064-3 - Validação de métodos analíticos de absorção, distribuição, metabolismo e eliminação (in vitro) utilizando a técnica de LC-MS/MS para aplicação no processo de desenvolvimento de novos fármacos, AP.PIPE
• Assunto(s): Espectrometria de massas Cromatografia líquida de alta eficiência Farmacocinética Fármacos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adme | cromatografia líquida de alta performance | Espectrometria de massas | fármacos | Química Medicinal - ADME

Resumo

RESUMO DO PROJETOA descoberta de um novo fármaco é um processo dinâmico e quanto mais cedo identificar-se as propriedades biofarmaceuticas de um composto, melhor será a produtividade, pois a maioria das drogas não alcança o consumidor final em decorrência de problemas com ADME. Para evitar desperdiço de tempo e capital, os laboratórios farmacêuticos em unanimidade, realizam os ensaios de ADME em um estágio incial do processo de desenvolvimento, pois 40% dos fármacos falham por não possuírem propriedades biofarmaceuticas (por exemplo, baixa bioaviabilidade). Sendo assim, as indústrias farmacêuticas adotam o seguinte lema: "falhar cedo e a custo menor, do que seguir adiante no processo e falhar mais tarde" e já ter utilizado de maior investimento para o desenvolvimento do projeto. Por isso, as informações de ADME (in vitro) no estágio inicial de desenvolvimento são de extrema importância no processo de decisão para atingir o objetivo final com menor custo e maior segurança. Com utilização das informações de "early ADME" as indústrias farmacêuticas reduziram a porcentagem de insucesso para 10%. Sendo assim, os ensaios de ADME são extremamente importantes para identificar as qualidades farmacológicas do ativo descoberto, permitindo que o fármaco siga para uma etapa mais avançada do processo de desenvolvimento, com maior embasamento científico, segurança e menor custo. DESCRIÇÃO DOS OBJETIVOSPrograma de treinamento de recursos humanos (bolsista) para transmição de conhecimento e auxiliar no desenvolvimento e aplicação dos métodos de Absorção, Distribuição, Metabolismo e Eliminação (ADME) in vitro para uma nova entidade química ou fármaco, utilizando como ferramenta à técnica analítica instrumental de cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS/MS).BOLSISTA (TT- 3) - Estudante graduado em química ou farmácia (Valor da Bolsa: R$ 929,10/mês).As atividades propostas para desenvolvimento neste período são:1-Levantamento Bibliográfico2-Treinamento na Técnica de Cromatografia Líquida acoplada a Espectrometria de Massas3-Aprendizado e aplicação dos protocolos de rotina de ADME4-Aprendizado no tratamento e significado dos resultados obtidos5-Comparação dos resultados com literatura existente6-Aprendizado na documentação dos protocolos e relatório contendo os resultados, segundo normas de qualidade interna e externa7-Relatório Final de Conclusão do Estágio.Métodos de ADMEAbsorção-Teste de Solubilidade (pH 7.4)-Teste de Lipofilicidade (Log D 7.4)-PAMPA (Parallel Artificial Membrane Permeation Assay)-Permeabilidade em células Caco-2-Teste de Estabilidade Química Distribuição-Teste "Protein-Binding"estabilidade em plasmaestabilidade em sangueMetabolismo/Eliminação-Estabilidade Metabólica ("Metabolic Stability") - Clearance (in vitro) em microssomos do fígado (espécies diferentes), S9 ou enzimas específica CYP450.-Perfil dos Metabólitos ("Metabolite Profile") (in vitro) - Elucidação estrutural-"Drug-Drug Interaction" - Microssomo do fígado (espécies diferentes), S9 ou enzima específica (CYP450) Microssomo Humano (Enzimas CYP: 1A2, 2A6, 2C9, 2C19, 2D6, 2E1 e 3A4)-Identificação de metabólitos fase II (glucoronídeos)-Identificação de Metabólitos conjugados-glutationaOutros-Verificação da Massa Molecular-Teste de impurezas em produtos de síntese ou formulação