Método para a determinação da distribuição de clones em co-cultura através de PCR em tempo real

• Processo: 13/04961-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2014
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Sindelia Freitas Azzoni
• Beneficiário: Karla Yukari Katayama
• Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/08089-2 - Desenvolvimento de uma plataforma de expressão, baseada em E. coli, para a produção de enzimas envolvidas na hidrólise de biomassas lignocelulósicas, AP.JP
• Assunto(s): Reação em cadeia por polimerase (PCR) Tempo-real Clonagem
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Co-cultivo | enzimas recombinantes | pcr em tempo real | Engenharia bioquímica

Resumo

Estabelecer e validar protocolo para a determinação da distribuição de clones para a expressão de diferentes enzimas recombinantes sendo produzidas em co-cultura através de PCR em tempo real. O emprego da técnica de PCR em tempo real para o acompanhamento da expressão de proteínas através da quantificação de mRNA é conhecido (Carapuça et al. 2007) e pretende-se neste trabalho fazer uso do mesmo conceito empregando-o na detecção e, se possível, a determinação da distribuição dos clones ao longo do tempo de cultivo. A distribuição dos clones dentro da cultura é um importante parâmetro de avaliação da técnica de co-cultura aplicada à produção de coquetéis sintéticos. A técnica de PCR em tempo real e o desenvolvimento de reações de PCR exigem um nível de qualificação do bolsista de pelo graduação, no mínimo. Neste trabalho será possível capacitar o bolsista em uma técnica muito importante para a busca de respostas em níveis da expressão de gênica, que pode ser muito bem aplicada em outras áreas de trabalho (saúde humana, veterinária, biomédica, etc.). (AU)