O uso de microrna para o tratamento do Câncer de próstata: estudos in vitro e in vivo

• Processo: 13/01523-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Kátia Ramos Moreira Leite
• Beneficiário: André Leopoldino Bordini
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Urologia Neoplasias da próstata MicroRNAs Experimentação In vivo Técnicas in vitro Reação em cadeia por polimerase (PCR) Modelos animais de doenças
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de Próstata | microRNA | Urologia

Resumo

Micro RNA (miRNA) são reguladores importantes da expressão dos genes e suas alterações estão relacionadas ao desenvolvimento e progressão de neoplasias. Estudos da literatura e resultados anteriores obtidos pelo nosso laboratório implicam alguns miRNA na progressão e recidiva bioquímica do câncer de próstata. Já estão disponíveis moléculas de miRNA para o tratamento de doenças. O intuito desse estudo é a pesquisa do papel de miRNA no tratamento do câncer de próstata metastático em modelos in vitro e in vivo. Método as linhagens PC3, DU145 e LNCaP serão utilizadas nos experimentos in vitro. Os miRNA e seus antagomirs serão transfectados com o uso da lipofectamina e após 24 h de exposição serão avaliados os índices de proliferação, apoptose e aneuploidia por citometria de fluxo. Alterações na capacidade de invasão celular serão analisadas com o uso de matrigel. Após os experimentos serão analisados os níveis de expressão dos genes-alvo RAS, MYC, MMP9 e CD44 pela técnica de PCR quantitativo em tempo real. Camundongos atímicos, machos com 5 ou 6 semanas serão injetados por via intraventricular com a linhagem PC-3M-Luc-C6. No dia 20 será avaliado o desenvolvimento das metástases ósseas com o uso de aparelho para análise de imagens in vivo IVIS. Os animais serão tratados com os miRNA e respectivos antiMiR nos dias 23 e 26 sendo avaliadas as repostas através das medidas das lesões com o mesmo equipamento nos dias 30, 34, 38, 42 e 44. No dia 48 após o último exame de imagem os animais serão sacrificados e seus órgãos analisados macro e microscopicamente. (AU)