Criopreservação de oócitos de Prochilodus lineatus (Valenciennes, 1836)

• Processo: 13/10807-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2013
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Recursos Pesqueiros e Engenharia de Pesca - Aquicultura
• Pesquisador responsável: Alexandre Ninhaus Silveira
• Beneficiário: Douglas de Castro Ribeiro
• Instituição Sede: Faculdade de Engenharia (FEIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Ilha Solteira. Ilha Solteira , SP, Brasil
• Assunto(s): Biotecnologia Congelamento Criopreservação Oócitos Análise morfológica Prochilodus lineatus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Análise Morfológica | Aquicultura | biotecnologia | Congelamento | crioconservação | Reprodução de peixes

Resumo

Objetiva-se desenvolver um protocolo para o congelamento de oócitos de Prochilodus lineatus, avaliando o uso de três soluções extensoras (solução de Ringer, solução de Hank e tampão fosfato) e de três substâncias crioprotetoras (Dimetilsulfóxido, Propilenoglicol, e Metanol), associadas a 0,2M de glicose, em crescentes banhos de osmolaridade (0,5M, 1M, 2M e 4M). Os oócitos serão envasados em palhetas de 0,5 ml, e expostos a uma curva de resfriamento de 2°C/min até -12,5ºC (por 5min), 0,3 C/min até -40°C, 10ºC/min até -80°C e 50°C/min até -160ºC, sendo posteriormente imersas em nitrogênio líquido (LN2) e estocadas por 24 horas. As amostras serão descongeladas em "banho-maria" a 27°C por 10s, e reidratados por banhos em soluções de osmolaridade decrescentes de crioprotetores (2M, 1 M, 0,5 M). A posterior integridade das membranas será avaliada pelo uso de corante azul de tripano, e a viabilidade pela fertilização dos oócitos. O experimento contará com amostragens composta por 100 oócitos e 5 repetições cada tratamento, sendo seus dados avaliados quanto à normalidade (Shapiro Wilk) e homogeneidade (Barlett) e as médias comparadas através de uma analise de variância (ANOVA) e Tukey (±=0,05). Morfologicamente, os embriões serão submetidos à microscopia óptica (coradas em PAS, HE e azul de toluidina), microscopia eletrônica de Varredura e microscopia eletrônica de transmissão. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

RIBEIRO, D. C.; CHAGAS, J. M. A.; BASHIYO-SILVA, C.; COSTA, R. S.; VERISSIMO-SILVEIRA, R.; NINHAUS-SILVEIRA, A.. Oocyte viability and cortical activation under different salt solutions in Prochilodus lineatus (Teleostei: Prochilodontidae). REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS, v. 52, n. 6, p. 932-938, DEC 2017. (13/10807-9)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

RIBEIRO, Douglas de Castro. Criopreservação de oócitos de Prochilodus lineatus (Valenciennes, 1836) (Teleostei, Prochilodontidae). 2015. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Engenharia. Ilha Solteira Ilha Solteira.