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Efeito da técnica de isolamento, fonte do tecido e passagem celular no número e fenótipo de células-tronco originárias da polpa dentária

Processo: 13/17758-3
Modalidade de apoio:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2014
Data de Término da vigência: 21 de dezembro de 2014
Área de conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Odontopediatria
Pesquisador responsável:Josimeri Hebling Costa
Beneficiário:Ana Paula Silveira Turrioni
Supervisor: Ricardo A. Battaglino
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Instituição Anfitriã: Forsyth Institute, Estados Unidos  
Vinculado à bolsa:11/13895-0 - Efeito direto e transdentinário do LED infravermelho sobre células-tronco da polpa dentária humana in vitro e sobre o complexo dentino-pulpar in vivo, BP.DR
Assunto(s):Células-tronco
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:pulp | stem cells | tissue regeneration | células-tronco

Resumo

A utilização de células-tronco provindas do tecido pulpar tem sido frequentemente relatada entre as técnicas de regeneração tecidual. Entretanto ainda não está descrito de forma detalhada a caracterização destas células, bem como qual população (células pulpares de dentes decíduos ou permanentes) seria mais eficiente para os diversos tipos de terapias. Deste modo, o objetivo do presente estudo será expandir cultura primária de células pulpares obtidas de dentes decíduos humanos esfoliados e 3º molares utilizando duas diferentes técnicas e comparar, por meio de testes específicos, a característica e quantidade de células-tronco em cada modelo. Para o estudo, o tecido pulpar, de 10 dentes decíduos esfoliados e 10 terceiros molares humanos, será obtido e dividido em duas partes, sendo as células isoladas por dois tipos de técnicas (explante e digestão enzimática). Após a expansão das culturas, a partir da 2ª passagem, serão realizados testes específicos para a caracterização e identificação de células-tronco. A imunofenotipagem será realizada por meio dos testes de imunofluorescência e citometria de fluxo, utilizando anticorpos específicos para marcação de células-tronco (nestina, vimentina, SH2, SH3 e Oct3/4). Ainda será realizada a cariotipagem das células, com o objetivo de confirmar a ausência de alterações cromossômicas brutas durante a cultura. Uma análise qualitativa será realizada com as imagens adquiridas com os testes de imunofluorescência e cariotipagem. Já para a citometria de fluxo, os dados serão avaliados quanto a sua distribuição, caso haja distribuição normal, será aplicado o teste de análise de variâncias a dois critérios fixos (tipo celular e número da passagem) complementados pelo teste de Tukey, se necessário. Caso a distribuição seja não normal os testes não-paramétricos serão os de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney. O nível de significância será de 5%. (AU)

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Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
TURRIONI, A. P.; BASSO, F. G.; MONTORO, L. A.; ALMEIDA, L. F. D.; DE SOUZA COSTA, C. A.; HEBLING, J.. Transdentinal photobiostimulation of stem cells from human exfoliated primary teeth. International Endodontic Journal, v. 50, n. 6, p. 549-559, . (11/13895-0, 13/17758-3)
TURRIONI, ANA PAULA; DE OLIVEIRA NETO, NILSON FERREIRA; XU, YAN; MORSE, LESLIE; DE SOUZA COSTA, CARLOS ALBERTO; BATTAGLINO, RICARDO; HEBLING, JOSIMERI. Proliferation rate and expression of stem cells markers during expansion in primary culture of pulp cells. Brazilian Oral Research, v. 35, . (13/17758-3)
ANA PAULA SILVEIRA TURRIONI; LIEGE ALDROVANDI MONTORO; FERNANDA GONÇALVES BASSO; LEOPOLDINA DE FÁTIMA DANTAS DE ALMEIDA; CARLOS ALBERTO DE SOUZA COSTA; JOSIMERI HEBLING. Dose-responses of Stem Cells from Human Exfoliated Teeth to Infrared LED Irradiation. Brazilian Dental Journal, v. 26, n. 4, p. 409-415, . (13/17758-3, 11/13895-0)
TURRIONI, ANA PAULA S.; BASSO, FERNANDA G.; MONTORO, LIEGE A.; DE ALMEIDA, LEOPOLDINA DE FATIMA D.; DE SOUZA COSTA, CARLOS A.; HEBLING, JOSIMERI. Phototherapy up-regulates dentin matrix proteins expression and synthesis by stem cells from human-exfoliated deciduous teeth. Journal of Dentistry, v. 42, n. 10, p. 1292-1299, . (11/13895-0, 13/17758-3)