Manutenção e preservação de inóculo e avaliação da intensidade das doenças

• Processo: 14/24171-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
• Pesquisador responsável: Lilian Amorim
• Beneficiário: Giovana Banzato de Barros
• Instituição Sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/24003-9 - Epidemiologia, avaliação de danos e controle de doenças da videira, AP.TEM
• Assunto(s): Fitopatologia Niágara Rosada Vitis labrusca Inoculantes agrícolas Phakopsora euvitis
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: doenças da videira | Fitopatologia

Resumo

Manutenção do inóculo: Mudas de videiras 'Niagara Rosada' enxertadas sobre 'IAC 766-Campinas' serão utilizadas em todos os experimentos. As mudas serão cultivadas em vasos do tipo CitrosPot (4 L e 35 cm de altura) em substrato estéril (terra argilosa, esterco de curral e areia na proporção 1:1:1), conduzidas em haste única e fertilizadas duas vezes por mês até alcançarem sete folhas totalmente expandidas. Um lote de cinco mudas será constantemente utilizado na manutenção do inóculo de Plasmopara viticola e outro na manutenção de Phakopsora euvitis. O inóculo inicial das três doenças fúngicas será obtido de folhas com sintomas típicos que serão coletadas em regiões produtoras do estado de São Paulo. Além disso, um isolado preservado de S. ampelinum será reativado. P. viticola: Folhas apresentando sintomas de míldio serão coletadas no campo e mantidas em câmara úmida por 12 horas a 20ºC. Posteriormente, os esporângios serão coletados das folhas através lavagem com água destilada fria (4ºC) contendo surfactante (40¼L de Tween 40/L). A suspensão será calibrada para a concentração de 104 esporângios mL-1 com o auxílio de uma câmara de Neubauer e então aspergida na face abaxial das folhas de cinco mudas de 'Niagara Rosada'. A germinação dos zoósporos será aferida em suspensões depositadas em lâminas escavadas, incubadas por 8 h a 20oC no escuro. As mudas inoculadas serão mantidas em câmara úmida por 24 horas. Após o período de câmara úmida, as plantas serão mantidas em temperatura de 22ºC e luminosidade controlada (12 h de fotoperíodo) em câmaras de crescimento de plantas (Conviron®) até o aparecimento de sintomas (aproximadamente 8-12 dias). O inóculo será preservado até o final dos experimentos por meio de inoculações sucessivas em mudas. P. euvitis: Urediniósporos de P. euvitis serão coletados de folhas com pústulas de ferrugem com o auxílio de bomba a vácuo. A suspensão será calibrada para a concentração de 104 urediniósporos mL-1 com o auxílio de uma câmara de Neubauer e posteriormente aspergida na face abaxial das folhas de cinco mudas. As plantas serão mantidas em câmara úmida, no escuro, por 24 horas. A germinação dos urediniósporos será aferida em lâminas de vidro incubadas por 24 h no escuro. Após o período de câmara úmida, as plantas serão mantidas em temperatura de 25ºC e luminosidade controlada (12 h de fotoperíodo) em câmaras de crescimento de plantas (Conviron®) até o aparecimento de sintomas. O inóculo será preservado até o final dos experimentos por meio de inoculações sucessivas em mudas.S. ampelinum: Será realizado o isolamento indireto desse patógeno, a partir de lesões de folhas doentes para meio de cultura ágar-água. Após o crescimento micelial de S. ampelinum, será feita a repicagem do patógeno para meio de cultura batata-dextrose-ágar (BDA). Esse isolado será então preservado, utilizando o método de Castellani. Xanthomonas campestris pv. viticola: Isolados conservados na EMBRAPA Semiárido serão multiplicados em NA. Regularmente os isolados serão transferidos para plantas e reisolados. Avaliação da severidade das doenças: A severidade das doenças será avaliada semanalmente, com o uso de escalas diagramáticas, nos ensaios de campo e via programa QUANT ao final dos experimentos. O bolsista irá auxiliar nessas avaliações (AU)