Microscopia de fluorescência com resolução temporal para estudar a terapia fotodinâmica em modelos de resistência multidrogas

• Processo: 15/10025-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Radiologia e Fotobiologia
• Pesquisador responsável: Mauricio da Silva Baptista
• Beneficiário: Carolina Santacruz Perez
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/50680-5 - Fotossensibilização nas ciências da vida, AP.TEM
• Assunto(s): Terapia fotodinâmica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Microscopia De Fluorescencia Confocal Resolvida No Tempo | Resistencia Multidrogas | Terapia Fotodinâmica | Terapia fotodinâmica

Resumo

PDT é um tratamento contra diversas enfermidades que tem como princípio básico o emprego de uma molécula fotossensível e luz visível.  O objetivo principal do projeto temático em vigência é identificar mecanismos de aumento de especificidade na indução de morte celular fotoinduzida. Uma possibilidade de aumentar a especificidade da PDT é identificar mecanismos de dano em proteínas de transporte multidrogas, que é um fator de resistência a tratamentos tumorais clássicos. Compararemos a atividade da fotossensitibilização de fenotiazínicos em modelos que expressam transportadores multidrogas em quantidades distintas. Estudaremos o efeito da PDT em diversos níveis: no nível celular, caracterizando a viabilidade das linhagens celulares, o efluxo de rodamina-123, a eficiência e o mecanismo de morte celular; no nível da proteína de transporte multidrogas, utilizando técnicas bioquímicas (western blot, espectrometria de massas); e no nível da geração dos intermediários reativos, que serão caracterizados por microscopia de fluorescência em tempo resolvido. O entendimento da relação entre a localização intracelular do fotossensibilizador e a eficiência de morte celular é crítica para o aumento da eficiência da PDT e pretendemos, estender a compreensão desta relação utilizando técnicas de microscopia de fluorescência confocal resolvida no tempo (FLIM, FRET, FRAP).