Avaliação da estabilidade do DNA genômico na presença de tiocianato de guanidina

• Processo: 15/07339-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Patricia Oliveira de Lima
• Beneficiário: Maria Eduarda Sartori Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 11/50419-2 - Comportamento e saúde bucal: perspectivas interdisciplinares e aspectos emocionais no processo saúde-doença, AP.TEM
• Assunto(s): Fisiologia oral DNA Saliva Guanidina Ácidos nucleicos Biomarcadores Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: DNA genômico | microbiota oral | saliva | tiocianao de guanidina | Fisiologia Oral

Resumo

A saliva é um biofluido corporal que se constituiu em uma boa fonte de biomarcadores, por ser considerado um método não invasivo e, portanto, mais aceitável pelos pacientes. Técnicas de biologia molecular, tais como PCR e sequenciamento, têm sido constantemente otimizadas em saliva a fim de se aprimorar as análises de microrganismos, já que o custo de sequenciamentos e genótipos de DNA na saliva tem diminuído nos últimos anos, contribuindo, assim, para o diagnóstico de patologias e desordens. Nesse sentido, o hidrocloreto de guanidina e o tiocianato de guanidina têm se mostrado poderosos agentes na purificação e detecção de ácidos nucléicos (DNA e RNA) devido ao seu potencial de lisar células e também devido ao seu potencial de inativar nucleases. Entretanto, o hidrocloreto de guanidina mostrou-se menos efetivo que tiocianato de guanidina. Considerando-se que relatos na literatura relacionando a influência dos sais de guanidina sobre a estabilidade do DNA em saliva são escassos, o objetivo desse trabalho é avaliar a estabilidade do DNA genômico (gDNA), observando-se quanto tempo após o descongelamento ainda é possível manter as propriedades desse ácido nucléico intactas e se o tiocianato de guanidina é capaz de prolongar essa estabilidade. Para isso, amostras de saliva de voluntários do curso de Odontologia serão utilizadas para extração de gDNA, seguida da quantificação do ácido nucléico extraído por PCR em tempo real.