Implantação da histologia CLARITY para o estudo do sistema nervoso

• Processo: 15/04098-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Geral
• Pesquisador responsável: Gabriel Maisonnave Arisi
• Beneficiário: Fábio Zanini
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Histoquímica Fluorescência Eletroforese Neurofisiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eletroforese | fluorescência | Histoquímica | macromoléculas in situ | Morfologia | permeabilidade macromolecular | Neurofisiologia

Resumo

A microscopia e as técnicas histológicas avançaram muito nossa compreensão da estrutura celular do tecido nervoso. No entanto, a complexa organização tridimensional dos neurônios, células gliais e da vasculatura é perdida no fatiamento do tecido nervoso para sua observação sob o microscópio. Métodos elaborados e demorados são utilizados para reconstruir a organização tridimensional dessas células. A técnica histológica CLARITY preserva a estrutura das proteínas celulares in situ e torna o tecido nervoso transparente à luz, removendo grande quantidade de lipídios presente nesse tecido, permitindo estudos envolvendo grandes volumes de diferentes regiões do cérebro. Esta histologia é feita por perfusão de monômeros que após a polimerização cria um hidrogel híbrido da proteína com o monômero, permitindo a remoção eletroforética dos lipídios. Esse hidrogel permite a visualização de grandes volumes do tecido em microscópios de fluorescência após marcação das proteínas de interesse por imunohistoquímica. (AU)