Construção de uma biblioteca de mutantes em Pseudomonas aeruginosa para o estudo da regulação da via de solubilização do fosfato de cálcio

• Processo: 16/00297-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2016
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Beny Spira
• Beneficiário: Jung Hun Park
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Fisiologia Fósforo Fosfatos de cálcio Ácidos orgânicos Elementos de DNA transponíveis Solubilização Análise de mutantes Pseudomonas aeruginosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ácido glicônico | biblioteca de mutantes | Pseudomonas aeruginosa | Solubilização de fosfato inorgânico insolúvel | Solubilização de compostos fosfáticos insolúveis

Resumo

Fósforo é um componente essencial para o desenvolvimento dos vegetais. No entanto, grande parte deste nutriente se encontra inacessível no solo devido à sua rápida precipitação em compostos fosfáticos insolúveis. Algumas espécies de bactérias desenvolveram estratégias para aproveitar o fosfato presente no solo. A mais bem estudada destas é a solubilização de fosfato mediada pela secreção de ácidos orgânicos, tal como o ácido glicônico. As bactérias transformam glicose em ácido glicônico, reação esta catalisada pela enzima glicose desidrogenase e seu cofator pyrroloquinoline quinone, que se situam na face externa da membrana plasmática. O ácido orgânico é liberado para o meio externo e reage com o fosfato insolúvel, dissociando o ortofosfato do metal. Neste projeto, pretendemos investigar a regulação do processo de solubilização de fosfato. Está sendo proposta a construção de uma biblioteca de mutantes na bactéria solubilizadora de fosfato Pseudomonas aeruginosa, através da inserção aleatória de transposons em seu genoma. Os mutantes com um padrão de solubilização diferente da cepa ancestral serão selecionados para o sequenciamento da região na qual ocorreu a inserção. Desta forma, esperamos identificar genes envolvidos na regulação do processo de solubilização de fosfato.