Efeito de diferentes meios de cultivo sobre marcações epigenéticas em fibroblastos bovinos

• Processo: 16/06731-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2016
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Flávio Vieira Meirelles
• Beneficiário: Dewison Ricardo Ambrizi
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Assunto(s): Epigênese genética Cultura de células Clonagem Exossomos Fibroblastos Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: clonagem | Cultivo celular | epigenética | Exossomos | Modificações pós-traducionais | Reprogramação | Epigenética

Resumo

A reprogramação do epigenoma através da transferência nuclear de células somáticas (TNCS) gerou grande expectativa na década de 90, com aplicações desde a produção de animais transgênicos até a clonagem de animais de alto valor genético. O nascimento da Dolly foi possível devido a perfeita sincronização celular, a qual foi possível através da utilização da redução do soro fetal bovino no meio de cultivo, induzindo as células ao estado de quiescência. Ainda hoje, mesmo após ~20 anos desde o nascimento do primeiro mamífero clonado, Dolly, seu uso permanece limitado devido a baixa eficiência da técnica ocasionada principalmente pela reprogramação epigenética errônea da cromatina das células doadoras de núcleo. Dentre os fatores responsáveis pelas alterações no epigenoma comumente observadas em animais produzidos in vitro, o soro fetal bovino é considerado um dos principais responsáveis. Fatores nutricionais podem induzir alterações nas marcas epigenéticas, e afetar o processo de reprogramação nuclear. Baseado nisso, a hipótese deste projeto é que as marcas epigenéticas das células somáticas utilizadas como doadoras de núcleo (fibroblastos) na TNCS se alteram em resposta ao meio de cultivo celular ou o ciclo celular. Por isso, neste estudo pretendemos estudar o efeito de diversos tipos de meio de cultivo e ou ciclo celular sobre marcações epigenéticas nos fibroblastos bovinos. Nós esperamos que isto possa auxiliar no desenvolvimento de metodologias mais eficientes para preparar células doadoras de núcleo para a clonagem. Assim como esperamos contribuir para a ciência básica, visando entender como o epigenoma das células somáticas de um organismo pode ser modulado em resposta a variações no seu ambiente.