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Papel do colesterol na criotolerância e viabilidade de embriões bovinos produzidos in vitro com diferentes cinéticas de desenvolvimento.

Processo: 16/05986-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de junho de 2016
Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2019
Área de conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Marcella Pecora Milazzotto
Beneficiário:Kelly Annes
Instituição Sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):18/01965-3 - O papel do colesterol na criobiologia, apoptose e conteúdo lipídico de embriões bovinos produzidos in vitro (PIV), BE.EP.DR
Assunto(s):Colesterol   Metabolismo dos lipídeos   Cinética   Lipídeos   Criopreservação
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Cinética | colesterol | Criopreservação | Embriões bovinos | Lipídeos | lipidoma | Metabolismo lipídico

Resumo

Embriões com quantidades elevadas de lipídeos têm seu desenvolvimento prejudicado, com aumento da morte embrionária e menor sobrevivência após criopreservação. Além disso, o conteúdo lipídico está relacionado com menor taxa de prenhez e baixo sucesso a criopreservação dos embriões PIV, quando comparados com embriões produzidos in vivo. Um componente que está presente tanto nas gotas lipídicas quanto nas membranas é o colesterol, que tem sido apontado pelos estudos recentes como um importante lipídeo a ser investigado mais intensamente, após terem demonstrado diferenças nas quantidades de transcritos de genes relacionados a essa via em embriões cultivados na presença e ausência de soro, bem como em embriões com cinéticas diferentes quando comparados aos produzidos in vivo. Diante disso, esse projeto tem como objetivo investigar o papel do colesterol em embriões bovinos de diferentes cinéticas de desenvolvimento, bem como a sua influência sobre a criopreservação e demais variáveis de viabilidade embrionária. Para isso, embriões bovinos serão produzidos in vitro em meio de cultivo suplementado com drogas inibidora (simvastatina) de e estimuladora (IGF- 1) da biossíntese do colesterol. Os embriões serão classificados quanto a cinética de desenvolvimento as 40hpi, coletados no estágio de blastocisto e avaliados quanto: a quantidade das gotas lipídicas (Nile Red), ao perfil de colesterol (espectrometria de massas), a quantificação de transcritos relacionados a via de síntese do colesterol (RT-PCR), a indução de apoptose (Caspase/ TUNEL), imunolocalização de proteínas chave na via de colesterol e criopreservação.

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ANNES, KELLY; MUELLER, DIEGO B.; VILELA, JORGE A. P.; VALENTE, RONIELE S.; CAETANO, DIANA P.; CIBIN, FRANCIELLI W. S.; MILAZZOTTO, MARCELLA P.; MESQUITA, FERNANDO S.; BELAZ, KATIA R. A.; EBERLIN, MARCOS N.; et al. Influence of follicle size on bovine oocyte lipid composition, follicular metabolic and stress markers, embryo development and blastocyst lipid content. REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT, v. 31, n. 3, p. 462-472, . (16/05986-0)
ANNES, KELLY; DE LIMA, CAMILA BRUNA; ISPADA, JESSICA; DOS SANTOS, ERIKA CRISTINA; FONTES, PATRICIA KUBO; NICHI, MARCILIO; GOUVEIA NOGUEIRA, MARCELO FABIO; SUDANO, MATEUS JOSE; MILAZZOTTO, MARCELLA PECORA. Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) selectively modulates the metabolic and lipid profile of bovine embryos according to their kinetics of development. Theriogenology, v. 204, p. 7-pg., . (17/18384-0, 16/05986-0)