Ruptura da interação mediada por manana entre fungo-bactéria como uma forma de controlar formação de biofilmes multi-espécies

• Processo: 18/18258-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Iracilda Zeppone Carlos
• Beneficiário: Thais de Cassia Negrini
• Supervisor: Hyun Koo
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Pennsylvania, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 17/13334-5 - Resposta imune induzida por biofilmes mono, dual e multiespecies formados por Sporothrix schenckii e/ou Staphylococcus spp., BP.PD
• Assunto(s): Biofilmes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bacterial | Biofilm | cross-kingdom | fungal | interaction | mannan | Imunologia

Resumo

Tem sido sugerido que os biofilmes de espécies mistas de fungo-bactéria podem ser mais virulentos como resultado da interação entre esses diferentes reinos de microrganismos mediada por mananas presentes na parede celular dos fungos. Nosso objetivo é avaliar o papel da beta-mananase no desenvolvimento de biofilme de espécies mistas através da ruptura da interação bacteriana-fúngica mediada por manana. Especificamente, este estudo tem como objetivo determinar os efeitos da beta-mananase nas forças de ligação bacteriana-fúngica e na estrutura 3D e na estabilidade mecânica dos biofilmes. Um modelo de biofilme bem caracterizado e validado baseado no co-cultivo de C. albicans e S. mutans será usado para melhor padronizar as condições experimentais para a atividade da mananase (Estudo 1). Em seguida, a mananase será testada contra S. schenckii e Staphylococcus usando o modelo acima mencionado e condições experimentais previamente padronizadas (Estudo 2). C. albicans e S. schenckii serão expostos a beta-mananase e após 60 minutos a viabilidade celular será avaliada por Fluorescência Confocal Time-Lapse, a morfologia celular será avaliada por Microscopia Eletrônica de Varredura e manana presente na parede celular fúngica após exposição à beta-mananase será quantificada. Adicionalmente, o efeito da beta-mananase sobre as forças de ligação entre C. albicans e S. mutans e entre S. schenckii e Staphylococcus aureus ou Staphylococcus epidermidis será avaliado por Microscopia de Força Atômica. Além disso, biofilmes mono-espécies ou multi-espécies de S. mutans / C. albicans e biofilmes mono-espécies ou multi-espécies de S. schenckii / S. aureus ou S. epidermidis serão cultivados por até 72 horas e expostos a beta-mananase duas vezes ao dia. Os biofilmes serão avaliados através de Microscopia de Varredura a Laser Confocal para determinar sua estrutura 3D, assim como o número de microcolônias e o tamanho das microcolônias. Além disso, o efeito da beta-mananase na coesão e estabilidade mecânica dos biofilmes será avaliado por um Testador de Força Mecânica de Biofilme Induzido por Cisalhamento sob tensão de cisalhamento constante. Espera-se que a virulência e o desenvolvimento de biofilmes de espécies mistas fúngicas-bacterianas seja controlada pelo rompimento de interações mediadas por manana.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

NEGRINI, THAIS DE CASSIA; KOO, HYUN; ARTHUR, RODRIGO ALEX; BELIBASAKIS, GN; HAJISHENGALLIS, G; BOSTANCI, N; CURTIS, MA. Candida-Bacterial Biofilms and Host-Microbe Interactions in Oral Diseases. ORAL MUCOSAL IMMUNITY AND MICROBIOME, v. 1197, p. 23-pg., 2019-01-01. (18/18258-8)