Avaliação in vitro da atividade funcional das células osteoblásticas MC3T3-E1 cultivadas com meio condicionado de macrófagos da linhagem RAW 264.7

• Processo: 18/23587-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2019
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
• Pesquisador responsável: Karina Fittipaldi Bombonato Prado
• Beneficiário: Sayuri Poli Suguimoto
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Metabolismo Osteogênese Cultura de células Osteoblastos Macrófagos Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Macrófagos | metabolismo | osteoblastos | Cultura de Células

Resumo

A osteogênese é alcançada não somente por células osteoblásticas do sistema esquelético, mas também como resultado de uma cooperação com múltiplos sistemas, entre eles, o imune. Células como macrófagos liberam várias moléculas sinalizadoras que poderiam afetar positiva ou negativamente a capacidade osteogênica dos osteoblastos. Sendo assim, o objetivo do presente projeto será avaliar a influência do meio condicionado de células da linhagem de macrófagos murinos RAW 264.7 na cultura de células osteoblásticas murinas MC3T3-E1. Após a armazenamento do meio condicionado, as células osteoblásticas serão cultivadas em garrafas em meio de cultura osteogênico até a subconfluência e plaqueadas em uma concentração de 2 x 104 células por poço em placas de cultura (n=5). Os grupos experimentais serão divididos em células controles (C) e células tratadas com 50% de meio condicionado de macrófagos (MC). Após os tempos experimentais, serão avaliados os seguintes parâmetros: proliferação celular, atividade de fosfatase alcalina, quantidade de proteínas totais, detecção in situ de ALP, além de detecção e quantificação de nódulos mineralizados. Os dados obtidos serão analisados por programas estatísticos adequados para p d 0.05, com o objetivo de encontrar dados estatisticamente significantes que demonstrem os efeitos do meio condicionado na atividade funcional dos osteoblastos.