Descoberta de genes-alvo para RNAi inseticida contra lagarta do cartucho, Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae)

• Processo: 19/19808-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Pesquisa
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
• Pesquisador responsável: Sergio Antonio de Bortoli
• Beneficiário: Sergio Antonio de Bortoli
• Pesquisador Anfitrião: Juan Luis Jurat-Fuentes
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Tennessee (UT), Estados Unidos
• Assunto(s): Interferência de RNA Entomologia agrícola Spodoptera frugiperda Genes alvo Bioensaio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Genes-alvo | lagarta do cartucho | RNAi | Spodoptera frugiperda | Entomologia Agrícola

Resumo

A pesquisa será realizada utilizando dados do transcriptoma de Spodoptera frugiperda (Lep.: Noctuidae), a lagarta do cartucho. Serão determinados homólogos para dez genes que relatados na literatura como eficazes para o silenciamento de genes inseticidas. As regiões de todos os genes alvo (~ 200 pb) serão selecionadas com base na literatura e clonadas em um plasmídeo com regiões promotoras T7 terminais em ambas as extremidades. A transcrição "in vitro" deverá produzir RNA de fita dupla (dsRNA) direcionado a cada gene. Como o dsRNA exibe baixa atividade por ingestão, a injeção será usada para testar a atividade inseticida dos dez dsRNAs preparados. Os dsRNAs serão injetados em larvas de 3º ínstar, e a mortalidade registrada até a pupação e emergência do adulto. Os dois dsRNAs mais ativos serão selecionados para os bioensaios. Os bioensaios serão realizados utilizando contaminação superficial da dieta com os dois dsRNAs mais ativos dos ensaios de injeção. A captação de dsRNA será aprimorada para aumentar a toxicidade usando intensificadores como lipossomas e nanopartículas que encapsulam o dsRNA. (AU)