Expressão e caracterização inibitória de fragmentos de anticorpos do tipo scFv contra a calicreína 7

• Processo: 19/11045-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2021
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Luciano Puzer
• Beneficiário: Rafael Cerioni Tognato
• Instituição Sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
• Assunto(s): Sistemas de liberação de medicamentos Anticorpos de cadeia única Inibidores de proteases Calicreínas Testes de sensibilidade microbiana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: calicreína | drug delivery | Klk7 | ScFv | Anticorpos Recombinantes

Resumo

Inibidores de proteases são moléculas capazes de afetar direta ou indiretamente o sítio ativo de enzimas proteolíticas, limitando ou eliminando sua capacidade de catalisar a clivagem de ligações peptídicas. Essas moléculas ainda podem atuar de forma seletiva ou específica, controlando endogenamente os mais diversos processos fisiológicos. Além disso, os inibidores de proteases também representam uma fatia considerável do mercado de fármacos, sendo utilizados em procedimentos terapêuticos onde as proteases têm algum papel relevante no desenvolvimento patológico. Desta forma, nos últimos anos nosso grupo de pesquisas vem atuando no desenvolvimento de inibidores para proteases, especificamente contra as calicreínas teciduais humanas (KLK), que compõem uma família de 15 serino proteases (KLK1-KLK15) distribuídas pelos mais variados tecidos do corpo humanos, e que apresentam diversas funções fisiológicas e patológicas. Anticorpos recombinantes do tipo sc Fv-Fc contra a (KLK7) foram previamente selecionados, expressados em linhagem humana HEK 293 e caracterizados quanto a sua capacidade de inibir a ação da protease. Os melhores anticorpos ainda foram utilizados em formulações para tratamento de doenças da pele utilizando um sistema de "drug delivery" baseado em hidrogéis. Assim, nesse projeto, propomos a expressão e caracterização inibitória dos fragmentos de anticorpos do tipo scFv. Nossa hipótese é que essas moléculas também terão a capacidade de inibir a KLK7, mas com um custo de produção bem mais baixo, visto serem expressos em bactérias. Além disso, esses fragmentos, por serem menores, podem ser encapsulados mais facilmente nos hidrogéis para "drug delivery".