Expressão de proteínas reguladoras do ciclo celular em células endoteliais resistentes ao anoikis submetidas ao silenciamento do sindecam-4

• Processo: 19/21382-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Carla Cristina Lopes de Azevedo
• Beneficiário: Bianca Zaia Franco Ferreira
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia celular Ciclo celular Neoplasias Anoikis Células endoteliais Inativação gênica Expressão de proteínas Desenvolvimento de fármacos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anoikis | câncer | ciclo celular | Sindecam-4 | Biologia Celular

Resumo

Anoikis é um tipo de morte celular regulada que ocorre por falta de adesão ou adesão inadequada da célula à matriz extracelular (MEC). Muitas células tumorais são resistentes ao anoikis, isso facilita a invasão dessas células e contribui para a metástase tumoral. Dados anteriores do nosso laboratório mostraram que as células endoteliais resistentes ao anokis apresentam alterações morfológicas, alta taxa de proliferação, baixa adesão à fibronectina, laminina e colágeno IV, desregulação do ciclo celular, acompanhado de aumento na expressão de sindecam-4 (SDC4). O SDC4 é um mediador central na adesão, migração e proliferação celular e pode interagir direta e indiretamente com outras moléculas da MEC e com proteínas do citoesqueleto durante a progressão do câncer e desenvolvimento da metástase. Apesar de ter papeis importantes em diversos eventos celular, o papel específico do sindecam-4 na desregulação do ciclo celular em células tumorais ainda não está completamente elucidado. Assim, esse trabalho tem como objetivo entender o papel do sindecam-4 na progressão do ciclo celular em células endoteliais resistentes ao anoikis que foram submetidas ao ensaio de silenciamento do gene sindecam-4 (Adh-shRNA-Syn4-EC), células endoteliais parentais resistentes ao anoikis (Adh-EC), células endoteliais selvagens (EC) e células endoteliais transfectadas com o oncogene EJ-ras (EJ-ras EC) em relação à expressão de proteínas reguladoras expressas nas diferentes fases do ciclo, como ciclinas e alguns inibidores ( P21 e P27). Os níveis de expressão dessas proteínas serão avaliados pelas técnicas de western blotting, PCR em tempo real (qPCR) e citometria de fluxo. Assim este estudo trará novos subsídios para o entendimento dos mecanismos de desregulação do ciclo celular durante a progressão do câncer, podendo auxiliar no desenvolvimento de novas drogas anticâncer e um melhor direcionamento no tratamento da doença.