Análise do potencial de indução da multidiferenciação do secretoma de esferóides de células-tronco da polpa dentária humana

• Processo: 19/27492-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Katiúcia Batista da Silva Paiva
• Beneficiário: Daniel Barrozo Ferreira
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Bioengenharia Células-tronco Polpa dentária Hipóxia Esferoides celulares Diferenciação celular Linhagem celular Modelagem tridimensional Reação em cadeia da polimerase em tempo real
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células-tronco da polpa dentária humana | Esferóides | hipóxia | Hipóxia central | Potencial de multidiferenciação | Secretoma | Bioengenharia de Tecidos

Resumo

Estudos indicam aumento no potencial de multidiferenciação de células-tronco da polpa dentária (DPSCs) no modelo de esferóide (3D). Isso está possivelmente atrelado ao fenômeno de hipóxia central que ocorre em esferóides após determinado tamanho, mas não está muito claro se a hipóxia central decorrente do tamanho do esferóide é um parâmetro importante que influencia o potencial de diferenciação do secretoma, e se um microambiente hipóxico também gera alguma modulação destes eventos. Assim, este trabalho pretende fazer uma abordagem inicial da influência da hipóxia no secretoma de esferóides de DPSCs levando em consideração o tamanho do esferóide/hipóxia central/potencial de multidiferenciação quando cultivadas em meio osteogênico. Para isso, iremos gerar esferóides de 3 tamanhos distintos: 100 (sem hipóxia central), 500 e 1.000 ¼m de diâmetro. Após 14 dias em meio osteogênico, coletaremos os respectivos meios condicionados e iremos adicioná-los as DPSCs indiferenciadas em monocamada (2D). Também faremos o experimento oposto, onde o meio condicionado de células 2D será incubado nos esferoides de DPSCs indiferenciadas. Após 7 dias em meio condicionado, analisaremos os marcadores de diferenciação de diversas linhagens celulares nestas células por PCR em tempo real. (AU)