Regulação redox das proteínas fosfatases mitocondriais dependente de manganês e investigação das suas redes de interação

• Processo: 21/13213-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Luciana Elena de Souza Fraga Machado
• Beneficiário: Naira Bellissimo Oliveira de Almeida
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/02605-3 - Modulação estrutural e funcional das proteínas fosfatases mitocondriais pelo metabolismo redox e as implicações na biologia celular, AP.JP
• Assunto(s): Biologia computacional Proteínas de transporte Fosfoproteínas fosfatases Mitocôndrias Macromolécula Redes de interação Análise in silico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bioinformática | mitocôndria | Ppm1K | Pptc7 | PP2Cm | Proteína serina | treonina fosfatase | Estrutura e função de proteínas

Resumo

A ação de defosforilação das proteínas fosfatases é de extrema importância para o controle de diversas funções celulares. Essas enzimas podem ser encontradas em diversos compartimentos celulares como no citosol e na mitocôndria. As proteínas fosfatases citoplasmáticas são altamente reguladas por oxidantes, no entanto a regulação redox das proteínas fosfatases mitocondriais ainda é desconhecida, apesar desta organela representar um dos principais sítios de produção de oxidantes celulares. Sendo assim, pretendemos analisar a regulação redox das proteínas fosfatases mitocondriais PP2Cm (proteína serina/treonina fosfatase 2C mitocondrial) e PPTC7 (proteína serina/treonina fosfatase canônica PP2C). Adicionalmente, buscamos compreender a regulação da PP2Cm e da PPTC7 a partir da identificação e análise de interação com proteínas ligantes. Sendo assim, serão realizados estudos in silico para a identificação de proteínas ligantes e análises in vitro da interação proteína-proteína através de ensaios de pull-down. A atividade dessas proteínas fosfatases serão mensuradas na presença de agentes oxidantes e redutores. A partir da análise da interface de interação entre as proteínas fosfatases e as proteínas ligantes, buscamos identificar motivos responsáveis pela interação. Com isso, esperamos elucidar a regulação da atividade da PP2Cm e da PPTC7, assim como as vias de sinalização em que elas participam, com base na identificação de alvos proteicos. (AU)