Estabelecimento da metodologia CRISPR-Cas9 e obtenção de plantas nocaute em genes candidatos a reguladores do processamento alternativo em estresse térmico em arroz

• Processo: 21/12014-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Botânica - Fisiologia Vegetal
• Pesquisador responsável: Cristiane Paula Gomes Calixto
• Beneficiário: João Henrique Servilha
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/13158-8 - Análise global do transcriptoma de arroz relacionado à memória de temperatura e respostas ao calor, AP.JP
• Assunto(s): Biologia molecular vegetal Expressão gênica Processamento alternativo Estresse térmico Calor Arroz CRISPR-Cas9
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: arroz | calor | CRISPR-Cas9 | expressão | Splicing alternativo | Biologia Molecular de Plantas

Resumo

O arroz é um dos alimentos mais consumidos no mundo, mas o estresse térmico afeta sua produção e a qualidade dos grãos. Para identificar soluções mecanicistas para melhorar o cultivo do arroz sob ameaças de mudanças climáticas, as respostas moleculares da tolerância ao estresse de calor devem ser identificadas. Controles transcricionais e pós-transcricionais estão envolvidos na ampla gama de respostas ambientais em plantas. O processamento alternativo, em particular, é um mecanismo envolvido na defesa da planta contra estresses, mas pouco se sabe como a variação das isoformas transcritas é regulada pelas mudanças de temperatura. Os níveis e a atividade de centenas de fatores de processamento e modificadores de cromatina/DNA mudam em resposta à temperatura, sugerindo envolvimento destes genes na regulação do processo alternativo de plantas em condições de estresse térmico. As proteínas codificadas pelos genes LOC_Os02g40900 e LOC_Os05g30140 em arroz possuem motivos de reconhecimento de RNA e ambos os genes são possíveis candidatos à reguladores do processamento sensíveis ao calor. Este projeto pretende gerar plasmídeos baseados na metodologia CRISPR-Cas 9 e usá-los para transformar arroz, possibilitando assim o estudo da função dos genes LOC_Os02g40900 e LOC_Os05g30140 em plantas de arroz mutantes não-transgênicas. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SERVILHA, João Henrique. Estabelecimento da metodologia CRISPR/Cas9 e obtenção de plantas knockout para genes candidatos a reguladores do splicing alternativo sob estresse térmico em arroz (Oryza sativa L.). 2024. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Biociências (IBIOC/SB) São Paulo.