Detecção e caracterização molecular de Anaplasma spp. em ovinos

• Processo: 22/06526-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Marcos Rogério André
• Beneficiário: Laís Engler
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Doenças transmitidas por carrapatos Anaplasmose Ovinos Anaplasma Reação em cadeia por polimerase (PCR) Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anaplasma spp | Anaplasmose | doenças transmitidas por carrapatos | Ovinos | Agentes transmitidos por carrapatos

Resumo

A anaplasmose é uma enfermidade transmitida por carrapatos que acomete ovinos e é causada por ±-proteobactérias do gênero Anaplasma spp. Pouco se sabe sobre a ocorrência e diversidade genética das espécies desse Anaplasma que parasitam ovinos no Brasil. O presente estudo tem como objetivo verificar a ocorrência e identidade molecular de Anaplasma spp. em amostras de DNA extraídas do sangue de 200 ovinos nas cidades de Guarapuava-PR, Jaboticabal-SP e em Campo Grande-MS. As amostras de sangue serão submetidas à extração de DNA e ensaios de PCR convencional para o gene endógeno gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (gapdh). As amostras positivas serão submetidas a ensaio de PCR convencional para Anaplasma spp. baseado no gene 16S rRNA e PCR em tempo real quantitativa (qPCR) para Anaplasma marginale baseada no gene msp1². As amostras positivas serão submetidas a ensaios de PCR adicionais para caracterização molecular com base em fragmentos gênicos distintos (msp4, msp5 e groEL). Os amplicons serão purificados e sequenciados por meio da técnica automatizada baseada no método de terminação de cadeia por dideoxinucleotídeos. As sequências obtidas serão submetidas a inferências filogenéticas para posicionamento destas dentro de um parentesco evolutivo com espécies e genótipos de Anaplasma spp. detectadas previamente em distintos locais do mundo. O presente trabalho contribuirá para compreensão da identidade molecular de Anaplasma spp. em ovinos no Brasil.(AU)