Expressão do gene IL-2 em adipócitos de pacientes com lúpus em diferentes estados nutricionais: estudo in vitro

• Processo: 22/13266-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2023
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Carolina Nicoletti Ferreira Fino
• Beneficiário: Amanda Alves Ribeiro
• Supervisor: Ana Belen Crujeiras Martinez
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universidade de Santiago de Compostela, Vida (USC), Espanha
• Vinculado à bolsa: 21/09753-8 - Efeitos epigenéticos de uma dieta com alto teor de gordura no tecido adiposo de animais com lúpus, BP.MS
• Assunto(s): Epigenômica Expressão gênica Lúpus Lúpus eritematoso sistêmico Obesidade Tecido adiposo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: epigenética | expressão gênica | Lupus | obesidade | Tecido adiposo | Epigenética Nutricional

Resumo

O lúpus eritematoso sistêmico (LES) está associado a uma desregulação imune complexa e sua fisiopatologia envolve interação multifatorial entre vários fatores genéticos e epigenéticos. A alteração nos padrões epigenéticos tem sido proposta como um importante fator contribuinte para o desenvolvimento da autoimunidade, e demanifestações fenotípicas específicas e resposta ao tratamento. O estudo tem como objetivo investigar possíveis alterações nos na expressão do gene IL-2 em adipócitos crescidos em meio de cultura com secretoma de pacientes com lúpus em comparativo ao grupo de pacientes com peso normal e com lúpus e obesidade. Serão incubados em placasde cultura de células de 6 poços (Iwaki, Tóquio, Japão) em 4 ml de meio sem soro que será trocado duas vezes a cada duas horas e novamente após 16 h. Meio de Eagle modificado de Dulbeco (DMEM) sem soro/vermelho de fenol fresco será adicionado eincubado por 24 horas. As células serão incubadas com secretoma de tecido adiposo humano por 24 h nas concentrações de 1% e 5%. Tratadas com ácido fólico 11,3¼M, dissolvido em NaOH 1 M, e uma mistura de doadores metil consistindo em ácido fólico, cloreto de colina e vitamina B12 após 48 h expostas ao veículo controle nas primeiras 24h. ao final do experimento o RNA será extraído. A análise de expressão gênica será realizada em triplicata em PCR tempo real (Applied Biosystems). Nas análises estatísticas serão utilizados os testes de Shapiro-Wilk, teste t independente teste U de Mann-Whitney, ANOVA de medidas repetidas e/ou testes de Wilcoxon. As interações serão inferidas por meio de regressões lineares e correlação de Pearson ou Spearman. A análise dos dados será realizada por meio do Statistical Package for Social Science (SPSS versão 22.0 Inc.Chicago. IL). O nível de significância será estabelecido em p d 0,05. (AU)