Efeito do ácido fólico nos níveis de metilação do DNA dos adipócitos em pacientes com lúpus: estudo in vitro

• Processo: 22/09301-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Carolina Nicoletti Ferreira Fino
• Beneficiário: Letícia Lobato Souza
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/01893-2 - Progressos em estudos epigenéticos nas doenças reumáticas auto-imunes: da bancada à clínica no Lupus Eritematoso Sistêmico, AP.JP
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/08563-6 - Metilação do DNA e expressão gênica de genes relacionados à obesidade em cultura de adipócitos, BE.EP.MS
• Assunto(s): Ácido fólico Epigenômica Inflamação Metilação de DNA Obesidade Doenças reumáticas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ácido fólico | epigenética | Inflamação | lupus eritematoso | Metilação do DNA | obesidade | Doenças Reumáticas

Resumo

O Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES) está associado a uma desregulação imune complexa e sua fisiopatologia envolve interação multifatorial entre vários fatores genéticos, epigenéticos e ambientais. A alteração nos padrões epigenéticos tem sido proposta como um importante fator contribuinte para o desenvolvimento da autoimunidade e de manifestações fenotípicas específicas e resposta ao tratamento. Sabe-se que a epidemia da obesidade afetou quase todas as áreas da saúde, incluindo o manejo de pacientes com LES. Assim, a proposta tem como hipótese que as consequências a longo prazo do LES por si só tenham grande impacto, mas em sinergia com o excesso de tecido adiposo, a carga é provavelmente ainda maior e pode ser minimizada pela modulação epigenética. O ácido fólico é um doador de metil para reações de metilação do DNA. Há evidências de que estímulos ambientais, como o padrão alimentar, são capazes de induzir alterações na metilação do DNA e que a suplementação de ácido fólico pode modificar o perfil de metilação do DNA. Evidências recentes sugerem que o baixo nível de folato está associado à diminuição da metilação global do DNA, que tem sido associada a um risco aumentado de LES e outras doenças autoimunes. Portanto, este estudo tem o objetivo de avaliar uma ligação direta e mecanicista entre o tratamento com ácido fólico, padrões epigenéticos e inflamação em células do tecido adiposo. Para tal, tecido adiposo humano será obtido de pacientes com LES e obesidade. Os tecidos serão processados para coleta do secretoma. Pré-adipócitos comercialmente disponíveis serão adquiridos de diferenciados de acordo com as instruções do fabricante. As células serão incubadas com secretoma de tecido adiposo humano por 24 h nas concentrações de 1% e 5%.As células serão tratadas com ácido fólico 11,3¼M, dissolvido em NaOH 1M, e uma mistura de doadores metil consistindo de ácido fólico, cloreto de colina e vitamina B12 por 48h e expostas ao veículo controle nas primeiras 24h. Finalmente, o RNA e o DNA serão extraídos para análises de metilação do DNA e expressão gênica.