Elucidando mecanismos de ação de vacinas multicomponentes com diferentes eficácias contra carrapatos

• Processo: 22/13778-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 28 de fevereiro de 2023
• Data de Término da vigência: 27 de janeiro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Isabel Kinney Ferreira de Miranda Santos
• Beneficiário: Thales Eduardo Galdino Andrade
• Supervisor: Andrew Barrett Ward
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Scripps Research Institute, San Diego, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 21/11245-0 - Avaliação da imunidade induzida por vacina formulada com múltiplos epítopos de proteínas salivares de carrapatos Rhipicephalus microplus, BP.DR
• Assunto(s): Imunidade humoral Mapeamento de epitopos Microscopia eletrônica Vacinologia Carrapatos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: imunidade humoral | mapeamento de epitopos | Microscopia Eletrônica | Vacinologia

Resumo

Vacinas iniciam barreiras no sistema imunológico com a finalidade de impedir o progresso de infecção para doença. No entanto, as estratégias tradicionais não têm sido bem sucedidas contra certos patógenos. No que diz respeito ao controle do carrapato bovino Rhipicephalus microplus, um ectoparasita com múltiplos mecanismos de parasitismo baseados em antígenos altamente variados que evadem as defesas de seus hospedeiros, até o momento, nenhuma vacina alcançou eficácia compatível com produtividade e memória imunológica duradoura. Nosso grupo identificou e testou várias proteínas derivadas das glândulas salivares desse parasita, os chamados antígenos expostos, com potencial de induzir anticorpos que neutralizam o parasitismo em todas as fases de sua vida. Em nosso último ensaio, com dois processos de fermentação, obtivemos e testamos seis quimeras recombinantes formadas por 13 antígenos salivares completos acoplados a ligantes e conectados a uma tag contendo epítopos de células T auxiliares. Essas quimeras forneceram uma eficácia geral de mais de 90% (ou seja, redução das cargas de carrapatos, conversão de refeições de sangue em massas de ovos e taxas de eclosão de ovos). No mesmo ensaio, testamos seis quimeras formadas pelos mesmos 13 antígenos salivares, mas truncadas com minimização de domínio, e duas quimeras formadas por todos os epítopos lineares de células B (BCLs) previstos com BebiPred para 15 proteínas salivares. As quimeras de antígenos truncados forneceram apenas 20% de eficácia e as quimeras de BCLs forneceram 70% de eficácia. Todas as quimeras foram imunogênicas, mas induziram títulos de anticorpos inferiores aos induzidos em animais que receberam 15 antígenos recombinantes individuais. Os mecanismos envolvidos nesses efeitos de eficácia e imunogenicidade variáveis precisam ser elucidados. A microscopia crioeletrônica é a base da vacinologia estrutural e foi recentemente aprimorada para investigar a dinâmica das respostas de anticorpos policlonais após a imunização (EMPEM, mapeamento de epítopos com soros policlonais por microscopia eletrônica). Esta técnica avalia as superfícies dos imunógenos para determinar os epítopos envolvidos nas respostas protetoras dos anticorpos. Este projeto aplica EMPEM para descrever em nível molecular as características imunogênicas de nossos antígenos e vacinas quiméricas contra R. microplus, correlacioná-los com eficácias e identificar com maior precisão os epítopos que estão efetivamente envolvidos no comprometimento do parasitismo de carrapatos. (AU)