AVALIAÇÃO DA VARIAÇÃO DO RNAm DO PRÉ-PRÓ-HORMÔNIO CONCENTRADOR DE MELANINA E NEUROGÊNESE NAS ÁREAS PRÉ-ÓPTICA MEDIAL E HIPOTALÂMICA LATERAL DE RATAS LACTANTES EM RELAÇÃO AOS NÍVEIS DE CORTICOSTERONA

• Processo: 22/14595-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Jackson Cioni Bittencourt
• Beneficiário: Camila de Carvalho
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/02224-1 - A existência da neurogênese durante o período da lactação, AP.TEM
• Assunto(s): Corticosterona Dexametasona Hormônio concentrador de melanina Metirapona Neurogênese Plasticidade neuronal Neurociências
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: corticosterona | Dexametasona | hormônio concentrador de melanina | metirapona | neurogênese | Neuroplasticidade | Neurociências

Resumo

Introdução: O hormônio concentrador de melanina (MCH) é responsável por uma gama de comportamentos motivados, dentre eles, o comportamento materno. Em ratas, ocorre um aumento gradual da presença de neurônios imunorreativos ao MCH (MCH-ir) na área pré-óptica medial (MPOA) no decorrer da lactação. Não obstante, durante o período pós-parto, os efeitos supressores da corticosterona são amplamente discutidos na literatura. Embora o papel do MCH não seja totalmente conhecido em relação ao comportamento materno, o surgimento de neurônios MCH-ir apenas durante essa fase em fêmeas sugere que ele está envolvido em fenômenos de neurogênese/neuroplasticidade. Objetivos: Objetivamos estudar os efeitos das alterações nos níveis de glicocorticoides sobre a MPOA e área hipotalâmica lateral (LHA) das células que expressam o mRNA do ppMCH.Materiais e Métodos: Para isso, utilizaremos o total de 48 ratos da linhagem Long-Evans (n = 48), sendo 30 fêmeas e 18 machos. As ratas serão acasaladas pelo método de harém. Ratas primíparas lactantes serão utilizadas para formar os seguintes grupos experimentais: controle negativo (C-), sem manipulação; grupo controle positivo (C+), tratados com injeção de soro fisiológico (solução salina 0,9%); grupo Metirapona (MET), tratados com Metirapona; grupo Dexametasona (DEX), tratados com Dexametasona; grupo formado com ratas nulíparas (sem manipulação) e grupo formado com machos (sem manipulação) (n = 6 por grupo). A coleta dos encéfalos e micropunch seguindo coordenadas estereotáxicas será realizada no 190 dia pós-parto (PPD). O material é coletado e imediatamente imerso em RNA later, formando pools de 2 animais por amostra. Em seguido, o material será submetido a RT-qPCR para quantificação da expressão gênica (de RNA mensageiro referente aos genes de interesse - ppMCH, CRH, CRHR1, DCX...). As secções do encéfalo de onde o micropunch será extraído serão fixadas, e em seguida submetidas a imuno-histoquímica para MCH e coloração de Nissl para certificar a região de coleta do micropunch. Contribuições: Nosso estudo visa compreender os fenômenos neuroplásticos/neurogênicos que ocorrem no hipotálamo durante a lactação e a sua relação com o MCH no modelo experimental proposto de alteração do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal.