Aplicação de marcadores moleculares para monitoramento da qualidade de linhagens celulares humanas e não humanas

• Processo: 23/01255-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pesquisa Inovativa em Pequenas Empresas - PIPE
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Érika Machado de Salles
• Beneficiário: Érika Machado de Salles
• Empresa: BS Análises Laboratoriais Ltda
• CNAE: Pesquisa e desenvolvimento experimental em ciências físicas e naturais ; Atividades profissionais, científicas e técnicas não especificadas anteriormente
• Vinculado ao auxílio: 22/07783-0 - Aplicação de marcadores moleculares para monitoramento da qualidade de linhagens celulares humanas e não humanas, AP.PIPE
• Assunto(s): Linhagem celular Eletroforese capilar Marcador molecular Desenvolvimento de vacinas Citotoxicidade SARS-CoV-2 Macacos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Análise de fragmentos | autenticação de linhagens celulares | Eletroforese de capilar | Identidade Genética | Análise de fragmentos

Resumo

Culturas celulares primárias, linhagens celulares contínuas (imortalizadas) e tecidos são de extrema importância para a indústria farmacêutica e pesquisa biomédica, por serem modelos de estudo de sistemas fisiológicos mais complexos. O controle de qualidade de linhagens celulares é essencial para garantir a reprodutibilidade. Embora as linhagens celulares sejam usadas por décadas, erros de identificação tais como as trocas de linhagens e a contaminação cruzada (intra- e interespecífica), permanecem sendo um problema. Desta forma, as ferramentas para autenticação de linhagens celulares são críticas para o controle de qualidade em experimentos biológicos baseados em células. Os métodos atuais para autenticar linhagens de células humanas utilizam-se marcadores de repetição curta em tandem (STRs), tendo como base os procedimentos utilizados com sucesso na comunidade forense para identificação humana. Porém, não há métodos baseado em STR para autenticar linhagens de células não humanas até o momento. Portanto, nosso projeto visa validar marcadores genéticos do tipo STR para autenticação de linhagens de células murinas e de células isoladas do rim do macaco verde africano (Chlorocebus aethiop sabaeus), linhagem esta designada como Vero e amplamente difundida em pesquisas que cultivam vírus, como para o isolamento do SARS-CoV-2, desenvolvimento de vacinas e ensaios de citotoxicidade. Além disso, nosso objetivo é desenvolver um serviço de autenticação de linhagens celulares em conjunto com a análise de contaminantes de cultura constantemente testados, como a presença de micoplasma e/ou presença de material genético murino em linhagens celulares humanas. De forma inovadora no Brasil, todo o nosso serviço será validado utilizando amostras em papel filtro e transporte à temperatura ambiente. Desta forma, o pesquisador de qualquer lugar do Brasil terá a oportunidade de realizar o acompanhamento de suas linhagens para o controle de qualidade de seus experimentos ou confirmar a identidade de linhagens recebidas em seu laboratório. Nosso grupo de pesquisa busca salientar, em termos educacionais, a importância do monitoramento das linhagens celulares, uma vez que tais ferramentas consistem de unidades com dinamismo populacional, isto é, com o avanço das passagens tendem a adquirir mudanças (mutações) que podem ser neutras ou que venham a impactar na uniformidade do sistema, consequente, gerando impactos na reprodutibilidade dos dados, custos financeiros e de esforços com repetições. Portanto, a própria Agência Nacional de Vigilância Sanitária já exige esse acompanhamento para empresas que exercem P&D na área de terapia celular, a título de controle de qualidade e rastreabilidade. (AU)