Estudo do envolvimento das modificações de RNA durante a relação parasito-hospedeiro de Leishmania

• Processo: 23/02341-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Nilmar Silvio Moretti
• Beneficiário: Artur Honorato Reis
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/03075-0 - Desvendando os mecanismos regulatórios envolvidos na relação parasito hospedeiro da Leishmania: foco nas alterações pós-transcricionais e pós-traducionais, AP.PNGP.PI
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/13752-2 - Impacto da modificação de mRNA m6A na resistência a antimoniais em Leishmania, BE.EP.MS
• Assunto(s): Leishmania Resposta imune
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: leishmania | Mettl3 | m6A | resposta imune | Relação parasito-hospedeiro de Leishmania

Resumo

O ciclo de vida das espécies do gênero Leishmania é complexo e envolve formas promastigotas flageladas presentes no inseto vetor flebotomíneo e formas amastigotas presentes no interior dos macrófagos do hospedeiro mamífero. Leishmania desenvolveu diferentes mecanismos de subversão das células hospedeiras, que vão de alterações na expressão de genes específicos até mudanças no metabolismo, como glicólise, garantindo sua sobrevivência durante a infecção. Modificações pós-transcricionais das moléculas de mRNAs, conhecidas como epitranscriptoma, como Nv-Metiladenosina (m6A), tem sido apontada como um novo regulador da resposta inflamatória durante infecção por agentes infecciosos. Os níveis de m6A na célula são regulados pelos writers METTL3, METTL14 e WTAP, que adicionam a modificação no mRNA; os erasers, FTO e ALKBH5, que atuam como desmetilases e os readers YTHDF1-2 e YTHDF1-3, que reconhecem a modificação e podem desencadear outros efeitos downstream. Considerando o papel da m6A na relação patógeno-hospedeiro durante a infecção por diferentes agentes e a capacidade da Leishmania de manipular a expressão gênica dos macrófagos, pretendemos nesse projeto investigar o papel das modificações de RNA durante a infecção por Leishmania. Para isso iremos: 1) Avaliar o perfil de expressão da maquinaria regulatória de m6A em amostras de pacientes diagnosticados com leishmaniose cutânea; 2) Avaliar os níveis de expressão proteica da maquinaria regulatória de m6A durante ensaios de infecção de macrófagos in vitro; 3) Realizar análises de sequenciamento direto de RNA para identificar os mRNAs modificados por m6A durante a infecção de macrófagos com Leishmania. Em conjunto, os dados que serão gerados com esse projeto permitirão avançarmos no entendimento dos mecanismos utilizados pela Leishmania para progredir durante a infecção nos macrófagos.