Uso da matriz extracelular do endométrio bovino para formação de hidrogel como modelo de comunicação materna embrionária in vivo

• Processo: 23/00654-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
• Data de Início da vigência: 27 de maio de 2023
• Data de Término da vigência: 26 de novembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Flávio Vieira Meirelles
• Beneficiário: Thais Sayuri Imura Oshiro
• Supervisor: Marcia de Almeida Monteiro Melo Ferraz
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Ludwig Maximilian University of Munich (LMU Munich), Alemanha
• Vinculado à bolsa: 21/13948-9 - Estabelecimento do cultivo in vitro de organoides endometriais bovinos para estudo da comunicação materna/embrionária., BP.MS
• Assunto(s): Bovinos Matriz extracelular Endométrio Troca materno-fetal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cattle | communication | maternal-embryonic | Comunicação materno embrionária

Resumo

Muito se tem discutido sobre a perda embrionária em bovinos de leite e de corte, tais perdas estão diretamente relacionadas com a falha na comunicação materna embrionária no útero, e o melhor entendimento desta comunicação é fundamental para melhorar a produção in vitro de embriões. O cultivo tridimensional (3D) de células endometriais, formam uma estrutura 3D, que melhora a comunicação intercelular e age de forma mais fisiológica, essa técnica vem sendo utilizada para entender melhor esse ambiente materno. A matriz extracelular (ECM) é um ponto chave para este tipo de cultura, pois apresenta uma composição estruturalmente estável que contribui para as propriedades mecânicas e bioquímicas para os tecidos. Assim, o principal objetivo deste projeto é isolar ECM endometrial para gerar um hidrogel ECM (EndoECM) e estabelecer cultivos de organoides de glândulas endometriais para um modelo de estudo in vitro de comunicação materna embrionária. No experimento l, descelularizaremos pedaços de útero, e então o fragmento endometrial será isolado e liofilizado. A ECM liofilizada resultante será digerida e neutralizada para converter em hidrogel e será caracterizada. Após a caracterização, procederemos ao experimento II. No experimento II, realizaremos o cultivo de células epiteliais glandulares para formação de organoides que serão co-cultivados com células epiteliais e estromais. Após sua formação e co-cultivo, iniciaremos o último experimento. O Experimento III será conduzido utilizando os organoides co-cultivados do Experimento II para gerar um ambiente materno para produção in vitro de embriões (IVEP). Os embriões serão produzidos in vitro em duas condições: 1) somente PIVE; 2) IVEP co-cultivado com endoECM e rodeado por uma monocamada de células epiteliais e estromais. As análises que serão realizadas neste projeto são as mesmas utilizadas na bolsa do aluno FAPESP no Brasil. Com isso, os dados obtidos podem ser comparados aos de outros grupos para determinar o melhor modelo a ser utilizado na comunicação materno embrionária. (AU)