Caracterização imunofenotípica e purificação de linhagens suínas geneticamente modificadas por FACS.

• Processo: 23/03029-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Silvano Mario Attilio Raia
• Beneficiário: Taina da Silva Bicalho
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Empresa: Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina (FM)
• CNAE: Atividades de atenção à saúde humana não especificadas anteriormente
• CNAE: Atividades de atenção à saúde humana não especificadas anteriormente
• Vinculado ao auxílio: 18/14275-5 - Produção nacional de suínos geneticamente modificados voltados para o xenotransplante de órgãos em humanos, AP.PITE
• Assunto(s): Suínos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Facs | Geneticamente modificados | Suínos | xenotransplante | Xenotransplante

Resumo

A citometria de fluxo é uma técnica utilizada para contar, examinar e classificar células suspensas marcadas com moléculas fluorescentes (fluoróforos e anticorpos conjugados a fluoróforos) em um fluxo em um tubo capilar, ao que se chama de efeito de focalização hidrodinâmica. As células passam enfileiradas no capilar onde essas são excitadas por um laser, onde os transdutores fotoelétricos coletam informações sobre elas, incluindo tamanho (FSC, forward scattering), granulosidade/complexidade (SSC, side scattering), e fluorescência de marcadores específicos (FITC, APC, PI, etc). Com a citometria de fluxo podemos identificar subpopulações de células que apresentam a expressão de proteínas específicas, identificar subpopulações de células vivas e mortas, caracterizar o tipo de morte celular induzida por um tratamento específico, verificar alterações no tamanho e complexidade celular. Complementar a essa técnica existe a possibilidade de selecionar as subpopulações para cultivo, o que é dito fazer um "sorting" de células, e feito por um equipamento de cell sorter (FACS sorting). Isso nos permite cultivar células com a presença ou ausência de alvos específicos, fornecendo agilidade e precisão de isolamento de subpopulações de células. Portanto, tal técnica será de grande utilidade para caracterização imunofetípica das linhagens celulares selvagens e das editadas geneticamente.