Efeitos da ingestão de Wasabi (Wasabia japonica) sobre a hepatocarcinogênese associada à fibrose em camundongos

• Processo: 23/01362-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2023
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Guilherme Ribeiro Romualdo
• Beneficiário: Taís Carolina Paes Bronzato
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Carcinoma hepatocelular Fibrose Transformação celular neoplásica Patologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: alil isotiocianato | carcinoma hepatocelular | Fibrose | Hepatocarcinogênese | Wasabi | Patologia

Resumo

O Carcinoma Hepatocelular (CHC) associado à fibrose/cirrose hepática é o terceiro tipo de câncer com maior mortalidade mundialmente, apresentando incidência crescente em países orientais. Devido ao seu mau prognóstico, estratégias preventivas para essa neoplasia maligna são encorajadas, incluindo a modulação do processo de hepatocarcinogênese por nutracêuticos. O rizoma do wasabi (Wasabia japonica (Miq.) Matsum) - um vegetal da família Brassicaceae - é amplamente utilizado como ingrediente na culinária japonesa. O rizoma é rico em compostos bioativos, incluindo o alil isotiocianato (AITC), que é considerado o mais abundante. Embora outros isotiocianatos do wasabi menos abundantes já tenham demonstrado efeitos inibitórios sobre células de CHC, os efeitos desse alimento in natura em modelos in vivo são desconhecidos. Assim, avaliaremos se a exposição ao wasabi ou ao AITC atenua a etapa de promoção da hepatocarcinogênese associada à fibrose em modelo animal. Para tanto, camundongos machos C57BL6/J serão submetidos a um modelo quimicamente induzido, iniciado por aplicações do carcinógeno genotóxico dietilnitrosamina (DEN) e promovido por injeções múltiplas do agente fibrogênico tioacetamida (TAA). Concomitante à promoção por TAA (6 semanas), os animais serão expostos por administração intragástrica (5×/semana) à pasta do rizoma de wasabi (50 ou 100 mg/kg peso corpóreo, Minato Wasabi, LTDA, Brasil) ou ao AITC (dose a definir). A dose de AITC será proporcional à quantidade desse mesmo composto na pasta de wasabi, que será determinada por cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas (GC/MS). Ao final do protocolo, os animais serão eutanasiados, amostras hepáticas serão coletadas para análises histológicas: (1) contagem e morfometria de lesões pré-neoplásicas (focos de hepatócitos alterados) em lâminas coradas por hematoxilina e eosina;(2) análise morfométrica de colágeno em lâminas coradas por Sirius red; (3) imunoistoquímica para os marcadores CD68 (macrófagos), ±-SMA (células estreladas) e Ki-67 (proliferação de hepatócitos; análises bioquímicas: (4) determinação dos níveis de malondialdeído (estresse oxidativo) e das enzimas antioxidantes superóxido dismutase e catalase; e análises moleculares: (5) immunoblot para os fatores de transcrição antioxidante Nrf2 e pró-inflamatório p65. O trabalho permitirá a comparação entre os potenciais efeitos do principal composto bioativo, o AITC, aos do alimento in natura.