Avaliação da perda da expressão de MTAP como estratégia de resposta à terapia em tumores cerebrais

• Processo: 22/14702-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Lucas Tadeu Bidinotto
• Beneficiário: Gabriel Tadeu Heitor Canas
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências da Saúde de Barretos Dr Paulo Prata (FACISB). Barretos , SP, Brasil
• Assunto(s): Glioblastoma Temozolamida Tratamento Oncologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: glioblastoma | Mta | Mtap | Temozolamida | Tratamento | 2-Fluoroadenina | Oncologia Molecular

Resumo

Nosso grupo de pesquisa encontrou perda cromossômica em regiões do braço curto do cromossomo 9 em uma porcentagem alta de pacientes diagnosticados com glioma, onde está presente o gene MTAP. Este gene codifica uma enzima essencial para os processos de reciclagem de adenina e metionina formados durante a degradação dos nucleotídeos. Estudos tem demonstrado que a administração de MTA, substrato do MTAP, tem atenuado a toxicidade de algumas drogas em células que expressam esta proteína. O objetivo do presente projeto é avaliar os efeitos da administração de MTA+2 fluoroadenina (2-FU) em camundongos nude que receberam xenoenxerto de células silenciadas para MTAP, e comparar este tratamento com o tratamento padrão para GBM (temozolamida+radioterapia). O gene MTAP será silenciado em células U251MG através de CRISPR/Cas9. Em seguida, será determinado o IC50 da combinação MTA+2-FU e temozolamida, para determinação da dose que será administrada em camundongos. Por fim, 48 camundongos serão distribuídos em 6 grupos experimentais (8 animais cada). G1 a G3 receberão xenoenxerto das células MTAP+ (controle), enquanto G4 a G6 receberão células MTAP-. Os grupos G1 e G4 receberão os veículos das drogas estudadas; G2 e G5 receberão injeções i.p. de temozolamida+radioterapia; G3 e G6 receberão MTA+2-FU. Os animais serão monitorados por equipamento de imagem e eutanasiados após 8 dias de experimento. Serão realizadas lâminas histológicas do tecido cerebral (análise tumoral), e de outros órgãos para análise de toxicidade. Os grupos experimentais serão comparados em função do volume tumoral, análise histológica dos tumores e toxicidade.