Métodos de maturação de oócitos e cultivo in vitro de embriões suínos.

• Processo: 23/03544-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética
• Pesquisador responsável: Silvano Mario Attilio Raia
• Beneficiário: Marilaine Fabrega Orteiro
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Empresa: Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina (FM)
• CNAE: Atividades de atenção à saúde humana não especificadas anteriormente
• CNAE: Atividades de atenção à saúde humana não especificadas anteriormente
• Vinculado ao auxílio: 18/14275-5 - Produção nacional de suínos geneticamente modificados voltados para o xenotransplante de órgãos em humanos, AP.PITE
• Assunto(s): Cultura de células Oócitos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cultivo celular | oócitos | xenotransplante | Xenotransplante

Resumo

A produção de porcos geneticamente modificados a serem utilizados no xenotransplante depende de um amplo domínio de tecnologias de reprodução (WELLS & PRATHER, 2017). Em suínos, esse conjunto de tecnologias ainda é subdesenvolvido em comparação com outras espécies (LUCAS et al., 2019). Para a obtenção dos embriões geneticamente modificados, nosso laboratório tem utilizado a Transferência Nuclear de Células Somáticas (TNCS), também é conhecida como clonagem, que consiste na injeção de uma célula (cujo DNA genômico foi previamente modificado) no interior de um oócito enucleado (WANG et al., 2020). A TNCS depende de diversas etapas: (1) Maturação in vitro (MIV) dos oócitos, (2) Transferência nuclear através de micromanipulação, (3) Fusão das membranas e ativação e (4) Cultivo in vitro (CIV) dos embriões. Entretanto, nenhuma dessas etapas apresenta um protocolo bem estabelecido (LUCAS et al., 2019), e os embriões provenientes do cultivo in vitro ainda têm um menor potencial de desenvolvimento do que embriões derivados in vivo. Nesse contexto, é absolutamente necessária a definição de protocolos robustos para transpor estas barreiras, envolvendo a seleção de condições externas adequadas e meios de cultivo otimizados para maturação, ativação e cultura de embriões, visando aumentar a taxa de eficiência na geração de animais geneticamente modificados. Devido ao fato de a produção de embriões in vitro depender de um protocolo extenso e envolver um amplo domínio de tecnologias de reprodução, somado à necessidade de se produzir embriões geneticamente modificados em grande quantidade (100 embriões para cada porca receptora). Faz-se necessário aumentar a nossa capacidade de produção de embriões por meio de treinamento de profissionais.