Explorando os fatores de interação de duas proteínas reguladoras da cromatina envolvidas no controle da transcrição do gene de virulência no parasita da malária Plasmodium falciparum

• Processo: 21/02298-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia
• Pesquisador responsável: Gerhard Wunderlich
• Beneficiário: Elaine Hellen Nunes Chagas
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Epigenômica Malária Plasmodium falciparum
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ap2-Exp | Ap2-O | epigenética | malária | Parasitololgia | Plasmodium falciparum | Biologia Celular de parasitos e vetores

Resumo

O parasita da malária humana Plasmodium falciparum expressa proteínas do tipo PfEMP, que são proteínas variantes do eritrócito infectado, que funcionam como ligantes para os receptores endoteliais nos vasos capilares, levando ao sequestro de eritrócitos bem como a malária grave. Apesar dos recentes avanços significativos, os fatores que orquestram a expressão monoalélica dos genes "var" que codificam entre 50 a 60 genes dentro de cada genoma do parasita ainda não foram totalmente identificados. Estudos prévios demostraram que o suposto fator de transcrição PfAP2-O influencia a transcrição de genes var e também outras famílias multigênicas. O knockdown temporário de PfAP2-O levou a uma perda completa da memória transcricional var e também levou a uma diminuição da citoaderência de células vermelhas infectadas do sangue. Da mesma forma, objetiva-se observar que outro fator PfAP2, AP2-exp, também interferiu na transcrição de genes 'var' após o knockdown parcial. Nas primeiras análises proteômicas por co-imunoprecipitação, ambos os fatores não interagiram com as histonas ou outros fatores que se ligam diretamente ao DNA, o que levanta a questão de como os fatores atuam no nível celular. Aqui, propomos elucidar fatores que se associam a PfAP2-O e PfAP2-exp por um novo método que permite a marcação de fatores com biotina na proximidade de PfAP2-O e PfAP2-exp. Após biotinilação seletiva, as proteínas serão então purificadas por colunas de estreptavidina e analisadas por espectrometria de massa. Dessa forma, este projeto aumentará nosso conhecimento sobre a transcrição do gene de virulência no parasita da malária, o qual é identificado como o mais patogênico, possivelmente levando a novos alvos de intervenção que colaborarão para o melhor entendimento na atuação de tais genes e possivelmente como bloqueá-los para que haja uma diminuição na transmissão do plasmódio e consequentemente a diminuição de casos da doença.