Isolamento de anticorpos anti-TIM3 a partir de bibliotecas combinatórias expressas no citoplasma de Escherichia coli

• Processo: 24/01723-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Daniela Luz Hessel da Cunha
• Beneficiário: Gabriel Correia Lima
• Supervisor: Matthew Delisa
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Cornell University, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 23/01816-6 - Seleção por phage display de anticorpos humanos recombinantes não-glicosilados contra os pontos de controle imunológico TIM-3, PD-1 e LAG-3, e sua caracterização como moléculas terapêuticas antitumorais e antivirais, BP.DD
• Assunto(s): Anticorpos Antineoplásicos Imunoterapia Anticorpos monoclonais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos | Antitumorais | imunoterapia | monoclonais | Tim-3 | Anticorpos monoclonais

Resumo

Este projeto tem como foco os pontos de controle imunológicos, reguladores cruciais da atividade dos linfócitos T. A descoberta dos pontos de controle imunológicos começou nos anos 90 com proteínas como o PD-1 e o CTLA-4. O TIM-3 é também um ponto de controle e está associado à evasão imune de tumores e vírus e o seu bloqueio por anticorpos monoclonais provou ser capaz de ser utilizado como alvo para terapias anti-tumorais em ensaios clínicos. A imunoterapia, que utiliza anticorpos monoclonais (mAb) para inibir os pontos de controle, revolucionou o tratamento de tumores. Os anticorpos monoclonais (mAbs) são fundamentais na biotecnologia, especialmente na oncologia. Nosso grupo no Laboratório de Desenvolvimento de Anticorpos do Instituto Butantan tem feito progressos no desenvolvimento de fragmentos de anticorpos. No entanto, a transição destes para o formato IgG completo pode ser complexa e ter impacto na interação com o antígeno e portanto um sistema de seleção em bactérias utilizando o formato IgG é de grande interesse. Este projeto tem como objetivo empregar uma estratégia de seleção genética em Escherichia coli (E. coli) para isolar IgGs completos contra TIM-3. O método utiliza proteínas de substrato que incorporam um antigénio fundido com cloranfenicol acetiltransferase (CAT). Utilizando a cepa geneticamente modificada SHuffle de E. coli, consegue-se uma expressão funcional de alto nível dos ciclonais, anticorpos produzidos no citoplasma de bactérias. Em conclusão, esta proposta delineia uma estratégia para aproveitar o potencial da seleção genética em E. coli para o desenvolvimento de anticorpos IgG anti-TIM-3, representando uma via promissora no campo da imunoterapia contra os pontos de controle imunológico.