Desenvolvimento de promotores sintéticos de cana-de-açúcar responsivos a deficit hídrico

• Processo: 24/01328-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2024
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2028
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
• Pesquisador responsável: Marcelo Menossi Teixeira
• Beneficiário: Bruno Spinassé Floreste
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Empresa: Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (Brasil). Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA). Embrapa Sede
• Vinculado ao auxílio: 22/04006-2 - Centro de Melhoramento Molecular de Plantas (CeM²P), AP.PCPE
• Assunto(s): Biotecnologia vegetal Melhoramento genético vegetal Cana-de-açúcar Estresse hídrico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: inducible promoter | sugarcane | synthetic promoter | water deficit stress | Biotecnologoia; Melhoramento

Resumo

A cana-de-açúcar é um cultivo de grande importância econômica para a produção de açúcar e etanol. O déficit hídrico é uma condição causada pela redução na precipitação e períodos de seca, sendo responsáveis por perdas significativas na produtividade. Diversas ferramentas biotecnológicas têm sido aplicadas para aumentar a tolerância ao déficit hídrico, na qual muitas vezes o uso de promotores constitutivos têm sido feito, o que pode levar a perdas de energia e efeitos deletérios. Promotores sintéticos têm sido desenvolvidos para um controle fino da expressão de transgenes, evitando esse tipos de problemas. Neste trabalho, vamos usar motivos de sítios de ligação de fatores de transcrição de cana-de-açúcar para desenvolver promotores sintéticos responsivos ao estresse hídrico. Esses motivos de DNA serão separados por espaçadores aleatoriamente gerados e associados com um promotor 35S mínimo. Estes promotores serão montados por clonagem de Golden Gate em vetores contendo um cassete de GFP e um promotor CaMV35 duplicado expressando RFP como controle. A fluorescência será analisada após transfecção de protoplasto, usando PEG como agente de déficit hídrico, e a arquitetura optimizada selecionada. Em seguida, fusões do promotor sintético com o gene GUS serão validadas in planta por transformação do cultivar SP80-3280. Plantas adultas serão sujeitas a tratamento de suspensão de rega e amostras de múltiplos tecidos serão analisados para atividade enzimática de GUS para quantificação da expressão pelo promotor. (AU)