Suplementação com miRNAs específicos durante o desenvolvimento embrionário inicial: uma ferramenta para melhorar a produção in vitro de embriões

• Processo: 24/07395-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
• Data de Início da vigência: 28 de agosto de 2024
• Data de Término da vigência: 21 de fevereiro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Juliano Coelho da Silveira
• Beneficiário: Camila Azzolin de Souza
• Supervisor: Dimitrios Rizos
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria (INIA), Espanha
• Vinculado à bolsa: 22/09461-0 - Transfecção de vesículas extracelulares do fluido folicular com microRNAs específicos: uma forma de miRNA delivery para células do complexo cumulus-oócito de bovinos, BP.MS
• Assunto(s): Embriogênese
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ambiente in vivo versus in vitro | Comunicação bidirecional entre embrião e estruturas maternas | Desenvolvimento embrionário | Melhora da qualidade embrionária | Produção in vitro de embriões bovinos | Suplementação com miRNAs durante CIV | Biotecnologias da Reprodução Animal

Resumo

O desenvolvimento embrionário ocorre dentro de um ambiente dinâmico, caracterizado por trocas moleculares entre o embrião e estruturas maternas. No entanto, essa condição é alterada quando os embriões são produzidos in vitro. Consequentemente, a inabilidade de replicar totalmente o ambiente in vivo provavelmente contribui para o potencial de desenvolvimento reduzido observado em embriões produzidos in vitro, exigindo o desenvolvimento de novas estratégias para aprimoramento. Pesquisas recentes têm se concentrado na entrega de moléculas bioativas, como miRNAs, a gametas e embriões in vitro, resultando em resultados promissores. Além disso, estudos anteriores realizados por nosso grupo identificaram alterações nos padrões de expressão de miRNAs durante o desenvolvimento embrionário, comparando embriões produzidos in vivo versus in vitro, revelando notável aumento nos níveis de miR-99a-5p em embriões de 4 células e miR-92a em embriões de 8 a 16 células que são produzidos in vivo. Esses miRNAs estão implicados em vias de sinalização críticas, incluindo Rap1 e ErbB, as quais são essenciais para o desenvolvimento embrionário inicial. Diante disso, propomos uma abordagem envolvendo a suplementação inicial do meio de cultura com miR-99a-5p até 54 h PI, seguida pela adição de miR-92a após 54 horas pós-inseminação (h PI) até 96 h PI para melhorar a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro. Através de uma série de experimentos envolvendo a suplementação do meio de cultura com miRNAs, avaliação da absorção de miRNAs, exploração da expressão de genes alvo de miRNAs e avaliação de parâmetros de desenvolvimento embrionário, nosso estudo visa oferecer insights valiosos para melhorar a produção e qualidade de embriões in vitro.