Modulação da película adquirida e do biofilme dentário para o controle da perda mineral dentária: uso de um gel inovador com associação da canecpi-5 à vitamina-e

• Processo: 23/16774-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
• Pesquisador responsável: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Beneficiário: Tamara Teodoro Araujo
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/26070-1 - Modulação da película adquirida do esmalte e do biofilme para o controle da perda mineral dentária: desvendando mecanismos e possibilitando terapias, AP.TEM
• Assunto(s): Biofilmes Cárie dentária Desmineralização Metaboloma Proteoma Bioquímica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biofilme | Cárie Dentária | Desmineralização | Metaboloma | Proteoma | Bioquímica

Resumo

A modificação da película adquirida do esmalte (PAE) pela incorporação da cistatina derivada da cana-de-açúcar tem mostrado efeitos promissores no controle do desgaste dentário erosivo (DDE) e da cárie dentária. No entanto, o seu mecanismo de ação envolve a reação com a hidroxiapatita, o que exige profilaxia profissional para a primeira aplicação. Recentemente, a associação da vitamina E com a CaneCPI-5, em aplicações isoladas, mostrou efeito sinérgico na prevenção da erosão dentária independente da ordem de aplicação e se foi feito antes ou após a formação da PAE, pois a vitamina E poderia facilitar a distribuição da CaneCPI-5 para a camada basal da PAE. No entanto, a realização de duas aplicações isoladas não é bem aceita pelos pacientes. Assim, no presente estudo, propomos o desenvolvimento de um gel nanoestruturado micelar contendo CaneCPI-5 e vitamina-E. Este gel será avaliado em relação ao seu potencial em: 1) alterar o perfil proteômico da película adquirida do esmalte após tratamento in vivo (Subprojeto 1); 2) alterações nos metabólitos da película adquirida do esmalte após tratamento in vivo (Subprojeto 1); 3) alterar o perfil do biofilme de microcosmo de esmalte (contagem de UFC) e a atividade bacteriana (microscopia confocal a laser) (Subprojeto 2a); 4) reduzir a desmineralização do esmalte provocada pelo biofilme microcosmo, conforme avaliado por microrradiografia transversal digital 3D (TMRD-3DSubprojeto 2a); 5) alterar as bactérias colonizadoras do biofilme, conforme avaliado por Hibridização Checkerboard DNA-DNA (Subprojeto 2b). Para a primeira etapa, será conduzido um estudo cruzado e triplo cego, constituído por 4 fases paralelas. Os voluntários, após profilaxia, terão a película formada por 1 hora e então será aplicado um gel contendo CaneCPI-5 + vitamina E (juntas ou separadas) e/ou placebo, por 4 min e removido gentilmente. Após, esperar-se-á 1 h para que haja interação dos princípios ativos do gel com as proteínas da PAE. A película será coletada e preparada para a análise proteômica e metabolômica. Na segunda fase, serão confeccionados blocos de esmalte bovino medindo 4x4 mm, os quais serão divididos em grupos conforme o tratamento aplicado [geis contendo: CaneCPI-5 + vitamina E (em conjunto ou isoladamente), flúor fosfatado acidulado 1,23%, Clorexidina ou placebo]. Os blocos serão incubados em pool de saliva humana por 8 horas para formação do biofilme. O biofilme microcosmo será estabelecido usando saliva artificial de McBain combinada com o pool de saliva humana e incubado por 16 h até atingir as primeiras 24 h. Posteriormente, os espécimes serão tratados de acordo com o grupo experimental por 4 min, seguido de enxágue com PBS. Em seguida, será adicionado meio fresco de McBain + sacarose. O experimento terá a duração de 5 dias, com o tratamento e o meio administrados uma vez ao dia. Análises de contagem de UFC, microscopia confocal e TMRD-3D serão conduzidas para avaliação. Para a última etapa, o biofilme de microcosmos será cultivado com os tratamentos previamente estabelecidos e então será realizada a análise de Hibridização Checkerboard. Essa nova abordagem poderá revolucionar a maneira como entendemos e manipulamos a estrutura e as propriedades da PAE, abrindo portas para novas estratégias de proteção envolvendo a engenharia da película, reforçando seu papel protetor, além de influenciar os colonizadores iniciais do biofilme.