Otimização da produção de VLP de vírus Zika em meio quimicamente definido utilizando os princípios de Quality by Design

• Processo: 23/17480-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2026
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Eutimio Gustavo Fernández Núñez
• Beneficiário: Vinícius Aragão Tejo Dias
• Instituição Sede: Escola de Artes, Ciências e Humanidades (EACH). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Células Sf9 Quality by design Vírus Zika
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células Sf9 | meio quimicamente definido | Otimização estatística de processos | Partículas semelhantes a vírus | Plataforma baculovírus | Quality by Design | Vírus Zika | Bioprocessos farmacêuticos

Resumo

Responsável por causar uma série de doenças congênitas em humanos, como microcefalia em recém-nascidos e síndrome de Guillain-Barré em adultos, o vírus Zika (ZIKV) começou a se espalhar pelas Américas em 2015 se tornando rapidamente um problema de saúde pública em pelo menos 33 países do continente. Tal epidemia gerou demanda para a formulação de profilaxias contra esse agente infeccioso. Nesse cenário, o desenvolvimento de vacinas seguras e eficazes para atenuar ou neutralizar as consequências da infecção por ZIKV tornou-se fundamental. Infelizmente, ainda não há nenhuma vacina aprovada que forneça imunização contra o ZIKV. Diante do exposto, as partículas semelhantes a vírus (VLPs), nanoestruturas compostas por proteínas virais capazes de se auto-montar, se revelam como candidatas vacinais contra o ZIKV. Esse produto biotecnológico mimetiza o vírus, induzindo resposta imune, mas em seu interior não há qualquer material genético viral, fazendo com que a partícula não seja infecciosa. O presente projeto objetiva produzir e caracterizar VLPs de ZIKV através do sistema de expressão células Sf9/baculovírus recombinante em meio quimicamente definido utilizando estratégias de Quality by Design como ferramenta para otimização desse bioprocesso. Para que o trabalho esteja em sintonia com o modelo de produção biofarmacêutico, inicialmente, será necessário avaliar e otimizar, em frascos agitados (cultura em suspensão) a multiplicidade de infecção viral (MOI) e o tempo de infecção (TOI), além do tempo de colheita (HT), do baculovírus recombinante carregando os genes das proteínas estruturais do ZIKV (BV-E-ZIKV) para melhor expressão das VLPs em quantidade e tamanho através de delineamento experimental. Em seguida, utilizando um biorreator operando de forma descontínua, serão estudados e otimizados, também por delineamento experimental, a concentração de oxigênio dissolvido no meio e a temperatura para expressão de VLPs. Em paralelo os nutrientes e metabólitos serão monitorados de forma off-line em ambos experimentos.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DA SILVA, JULIA DEZANETTI; DIAS, VINICIUS ARAGAO TEJO; RABELLO, JULIA PUBLIO; BARRANCE, FERNANDA ANGELA CORREIA; TERUYA, MILENA MIYU; TACIRO, MARILDA KEICO; JACOBUS, ANA PAULA; LEME, JACI; BERNARDINO, THAISSA CONSONI; JORGE, SORAIA ATTIE CALIL; et al. Monitoring of Zika-VLP production by 2D fluorescence spectroscopy and multi-way partial least squares. SPECTROCHIMICA ACTA PART A-MOLECULAR AND BIOMOLECULAR SPECTROSCOPY, v. 344, p. 11-pg., 2025-07-14. (24/02567-2, 22/02713-3, 23/09463-5, 23/14085-0, 23/17480-7)

DIAS, VINICIUS ARAGAO TEJO; OCTAVIANO, ANA LUIZA MORAES; RABELLO, JULIA PUBLIO; BARRENCE, FERNANDA ANGELA CORREIA; BERNARDINO, THAISSA CONSONI; LEME, JACI; JORGE, SORAIA ATTIE CALIL; NUNEZ, EUTIMIO GUSTAVO FERNANDEZ. Critical parameters on Zika virus-like particles' generation. Journal of Virological Methods, v. 334, p. 15-pg., 2025-02-26. (22/02713-3, 23/16332-4, 23/17480-7)